Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Preacondicionamiento de células madre y estromales derivadas de tejido adiposo humano: evaluación de regímenes de preincubación a corto plazo para mejorar su potencial regenerativo

Patrick C Baer, ​​Jürgen M Overath, Anja Urbschat, Ralf Schubert y Helmut Geiger

Objetivo: La terapia basada en células madre parece ser una opción prometedora para apoyar la regeneración después de un fallo orgánico o una lesión tisular. El trasplante de células madre mesenquimales requiere células con una capacidad regenerativa máxima. Por lo tanto, es urgente investigar nuevas estrategias para mejorar la liberación de factores regenerativos de las células madre mesenquimales.

Métodos: Se aislaron células madre/estromales derivadas de tejido adiposo humano (ASC) de lipoaspirados, se caracterizaron y se cultivaron. Las células se cultivaron en condiciones estándar o se preacondicionaron mediante incubación en un entorno hipóxico (0,5 % de O2) o en normoxia en presencia de factor de necrosis tumoral-α (TNFα) humano recombinante o factor de crecimiento epidérmico (EGF) humano recombinante durante 48 horas. En primer lugar, se evaluaron siete factores promotores de la regeneración seleccionados mediante análisis de qPCR. Después, se estimó el secretoma de las ASC utilizando una matriz de proteínas disponible comercialmente para 507 proteínas.

Resultados: El análisis de PCR mostró una inducción diferencial de la expresión génica de las ASC por los tres pretratamientos. Mientras que las ASC en hipoxia mostraron una inducción significativa del ARNm de VEGF, FGF-7 e IGF-II, los otros pretratamientos no indujeron cambios significativos en la expresión de VEGF. La expresión génica de HB-EGF y M-CSF se indujo significativamente en hipoxia y por incubación con TNFα, pero no con EGF. El ARNm de tipo angiopoyetina 1 no se indujo significativamente por los tres regímenes de preacondicionamiento. La evaluación por la matriz de proteínas reveló que de las 507 proteínas investigadas, el 21,9% se encontró que aumentaba más de cinco veces después de la incubación en hipoxia (111 de 507 proteínas). La preincubación con EGF resultó en una regulación positiva del 32,3% (164/507), mientras que el TNFα reguló positivamente el 28,8% de todas las proteínas evaluadas (146/507).

Conclusión: Los resultados indican que los tres regímenes de preacondicionamiento indujeron una amplia variedad de proteínas. Sin embargo, el pretratamiento a corto plazo con EGF indujo la mayor cantidad de proteínas y, por lo tanto, parece ser el mejor régimen de preacondicionamiento para los enfoques terapéuticos celulares.