Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Una peroxidasa asociada a la defensa del limón que tiene la capacidad de decolorar los tintes y ofrece resistencia al calor, a los metales pesados ​​y a los disolventes orgánicos

Veda P Pandey, Prakash K Bhagat, Ramgopal Prajapati, Nivedita Jaiswal, Swati Singh, Manika Awasthi y Upendra N Dwivedi

Las peroxidasas tienen la capacidad de catalizar la reacción redox de una amplia gama de compuestos fenólicos y no fenólicos y exhibieron varias funciones fisiológicas en el ciclo de vida de la planta. Desde el punto de vista de las aplicaciones industriales de las peroxidasas, el aislamiento y caracterización de las peroxidasas que ofrecen resistencia a pH y temperatura más altos, sales y solventes orgánicos es altamente deseable. En esta dirección, se aisló y caracterizó un clon de ADNc parcial de peroxidasa de limón. Se encontró que la peroxidasa estaba asociada a la defensa como es evidente por la mayor expresión en estado enfermo que en estado sano tanto en los niveles de transcripción como de actividad enzimática. Esta peroxidasa relacionada con la defensa de las hojas de limón se purificó hasta homogeneidad utilizando procesos rápidos de dos pasos de tratamiento térmico y cromatografía de afinidad . Se encontró que la peroxidasa nativa era un heterotrímero de 200 kDa, que consta de dos subunidades cada una de 66 kDa, mientras que una subunidad de 70 kDa. Se encontró que la peroxidasa purificada era estable al calor (mantuvo el 92% de actividad a 80°C durante 1 h) y a los solventes orgánicos, a saber, etanol, metanol e isopropanol (mantuvo el 30-50% de actividad en presencia del 50% (v/v) de estos solventes durante 1 h). La peroxidasa purificada también exhibió tolerancia a iones de metales pesados ​​como Cd2 ⁺ , Ni2 ⁺ y Cs2 ⁺ . Se encontró que la peroxidasa de limón purificada oxidaba eficientemente los tintes industriales en el orden de azul de anilina>naranja de metilo>carmín índigo>azul tripán>violeta cristal, de modo que se observó una decoloración del tinte del 40-54% en 4 h. Por lo tanto, las propiedades exhibidas por la peroxidasa de limón purificada la convierten en una enzima candidata prometedora para la explotación industrial.