Pharmaceutica Analytica Acta

Abstracto

Un método mejorado y sensible para la estimación de vitamina D3 mediante RPHPLC

Subodh Kumar, Diwesh Chawla y Ashok Kumar Tripathi

A pesar de la abundante luz solar, la deficiencia de vitamina D (VDD) en la India es una epidemia. Entre el 50 y el 90 % de la población de todos los grupos de edad está asociada con VDD. Entre los métodos comunes (RIA, inmunoensayo, etc.) disponibles para la estimación de la vitamina D, el método analítico como HPLC se considera un estándar de oro. En el estudio propuesto, hemos desarrollado un método RP-HPLC para la estimación de la vitamina D3 con mayor precisión y exactitud. La separación se logró en una columna C18 en modo isocrático utilizando dos fases móviles diferentes, es decir, acetonitrilo: metanol (método I) y metanol: agua con 0,1 % de ácido fórmico (método II). La columna se mantuvo a 40 °C y la fase móvil se bombeó a un caudal de 0,4 mL min−1. La detección del eluyente se llevó a cabo a λmax 265 nm. El tiempo de retención de vitamina D3 para el método I y II fue de 7,14 y 7,01 minutos, respectivamente, con R2>0,99. Las curvas estándar fueron lineales en el rango de concentración de 0,5-5 ng mL−1. Los valores LOD y LOQ para vitamina D3 para el método I y II fueron de 1,64, 5,02 y 1,10, 3,60 ng mL−1, respectivamente. El porcentaje de recuperación fue de 69-79% y 75-87% para el método I y II, respectivamente. El % RSD de precisión intra e interdía del método I fue <2 y <7%, mientras que, para el método II, <2 y <4% respectivamente. En conclusión, el método II mostró mayor precisión y exactitud y también fue rentable, por lo tanto, puede usarse para la estimación de vitamina D3 a escala de laboratorio.