Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Desarrollo y validación de un método analítico para la determinación de la concentración de los fármacos antibacterianos clorhidrato de besifloxacino y fenoxietanol en formulación en gel

Pradeep Kumar, Neelam Pawar*, Neha Minocha, Kavita Bahmani, Asha Poonia

Objetivo: El objetivo del presente trabajo es desarrollar un método analítico y validarlo para la determinación del ensayo de una formulación antibacteriana en gel.

Antecedentes: La validación de un método analítico es un proceso que implica estudios de confirmación de que el procedimiento/método/sistema/analista proporciona un resultado preciso y reproducible reconocido por estudios de laboratorio de investigación de que las características de desempeño de la técnica cumplen con las necesidades requeridas para las aplicaciones analíticas.

Objetivo: Mejorar las condiciones y los parámetros que se deben seguir en el desarrollo y la validación mediante el desarrollo de un nuevo método de RP-HPLC sensible y preciso. Validar los métodos propuestos recientemente desarrollados de acuerdo con los parámetros analíticos mencionados en las directrices IP, USP, BP e ICH.

Métodos: El método HPLC se validó para indicar que el procedimiento analítico utilizado es adecuado para el uso previsto mediante el uso de varios parámetros como especificidad, linealidad, LOD, LOQ, precisión, exactitud, rango, robustez, estabilidad en solución analítica e idoneidad del sistema.

Resultados: Los tiempos de retención para el fármaco estándar besifloxacino fueron de 7,781 min y la muestra de 7,731 respectivamente. El área del estándar besifloxacino fue de 1828547 y el área de la muestra de 1825315. El ensayo de la muestra fue del 98%. Los tiempos de retención para el fármaco estándar fenoxietanol fueron de 2,010 min y la muestra de 2,004 respectivamente. El área del estándar fenoxietanol fue de 438025 y el área de la muestra de 438103. El ensayo de la muestra fue del 97,04%. En la idoneidad del sistema, la RSD para 5 inyecciones replicadas para cada pico es del 0,33%. En cuanto a la especificidad, los picos de diluyente, placebo e impurezas no interfieren con los picos de besifloxacino. Se encontró que los picos de besifloxacino eran puros. Se encontró que los productos de degradación estaban bien separados del pico de besifloxacino. El factor de pureza pico fue NLT 0,9995. En el estudio de precisión, la RSD de precisión del sistema del tiempo de retención para besifloxacino obtenido a partir de seis inyecciones replicadas fue del 0,33 %. La RSD del área de besifloxacino obtenida a partir de seis inyecciones replicadas es del 0,46 %. La RSD de precisión del método se calculó en 6 determinaciones del valor de ensayo del fármaco besifloxacino y es del 0,56 %. La RSD calculada en 6 determinaciones para el valor de ensayo del fármaco besifloxacino es del 0,50 %. En precisión intermedia, la RSD se calculó en 6 determinaciones para el valor de ensayo del fármaco besifloxacino es del 0,50 %. La RSD calculada en 12 determinaciones (precisión del método y precisión intermedia) para el valor de ensayo es del 0,50 %. Estabilidad en solución analítica para el estándar y la muestra, se encontró que la diferencia de área del pico de besifloxacino estaba dentro de ± 2,0 % de la linealidad inicial. El coeficiente de correlación y el coeficiente de regresión (R cuadrado) no deben ser inferiores a 0,995 para besifloxacino. El coeficiente de correlación es 0,998. El coeficiente de regresión es 1,000. El % de intersección debe estar dentro de ± 5,0 % de la respuesta al nivel del 100 %. Precisión al nivel del 50 % y 150 %: la RSD es 0,01 %. Precisión al nivel del 50 % y 200 %: la RSD se encontró que era NMT 2,0 %. La media de precisión del % de recuperación en cada nivel se encontró que estaba entre el 98 y el 101 % del fármaco besifloxacino. La RSD en 9 determinaciones (3 niveles x3) es 1,2, que sigue los criterios del rango NMT 2 %. Se encontró una correlación del 1,0 % para los parámetros de precisión y linealidad.

Conclusión: La recuperación se encuentra entre el 98% y el 101% y el % RSD para todos los valores de recuperación es de 1,41%, lo que se encuentra dentro de los límites. En el método HPLC, las condiciones se optimizaron para obtener una separación adecuada de los compuestos eluidos.