Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Criterios de evaluación de biocompatibilidad para nuevos materiales de xenoinjerto: distribución y cuantificación de ácido nucleico remanente y epítopo alfa-gal

Naso Filippo, Aguiari Paola, Yopu Laura, Spina Michele y Gerosa Gino

Objetivo: En la actualidad, se utilizan estructuras xenogénicas descelularizadas comercialmente para la curación de tejidos enfermos. Curiosamente, su uso está permitido incluso en ausencia de cualquier evaluación de la eliminación de material celular xenogénico, como los epítopos alfa-Gal. Además, los procedimientos de descelularización no se controlan para demostrar la eliminación del potencial calcificado asociado a los restos de ácidos nucleicos. El tratamiento actual con glutaraldehído no puede garantizar una inmunotolerancia completa de los tejidos xenogénicos implantados, reduciendo pero no eliminando la inmunogenicidad, particularmente para el epítopo alfa-Gal (el principal obstáculo para el éxito del xenotrasplante). Recientemente, nuestro grupo ha publicado extensamente estudios centrados en la evaluación de las propiedades de biocompatibilidad de los tejidos xenogénicos. En este informe, estamos realizando esta investigación y la detección de ácidos nucleicos en nuevos tejidos xenogénicos que han mostrado resultados preclínicos/clínicos muy prometedores en diferentes áreas de aplicación. Métodos: La cuantificación de alfa-Gal se realizó mediante una prueba ELISA previamente desarrollada y patentada por nuestro equipo de investigación que implica el uso del anticuerpo monoclonal anti alfa-Gal M86. El análisis de inmunofluorescencia se realizó para la distribución visual tanto de epítopos xenogénicos como de residuos de ácidos nucleicos. Finalmente, para la cuantificación total de ADN se adoptó un kit disponible comercialmente. Resultados: Si bien se encontró que la cantidad y la distribución de los epítopos alfa-Gal eran diferentes entre los biomateriales investigados, la presencia de restos de ácidos nucleicos se reveló como una característica común, incluso en aquellos tejidos entregados como acelulares por el fabricante. Conclusión: Las evaluaciones cuantitativas insuficientes realizadas a nivel preclínico sobre el contenido residual de epítopos xenogénicos, detergentes y materiales de ácidos nucleicos en andamios han llevado a resultados decepcionantes y desastrosos. El riesgo de que estos dramáticos accidentes vuelvan a ocurrir sigue siendo muy alto a menos que se identifiquen e introduzcan en las prácticas de fabricación parámetros de seguridad, entre ellos la eliminación completa de los principales determinantes xenogénicos (alfa-Gal) y de los residuos de ácidos nucleicos propensos a la calcificación .