Hassan Dana, Ali Mazraeh, Ghanbar Mahmoodi Chalbatani, Vahid Marmari, Habibollah Mahmoodzadeh, Ali Ghamari, Fateme Moazzen, Mohammad Ebrahimi y Narges Mehmandoost
Introducción: ALCAM es una glicoproteína que pertenece a la familia de las inmunoglobulinas y desempeña un papel importante en el crecimiento, la supervivencia y la motilidad celular. Esta proteína también contribuye al desarrollo de la invasión tumoral en los cánceres colorrectal y de mama y se considera significativamente un marcador de células madre cancerosas. ALCAM es un antígeno de superficie celular, con una alta expresión en algunos cánceres como el colorrectal y el de mama, y tiene el potencial de diagnosticar y tratar estos cánceres. Objetivos: Al igual que con otras proteínas de membrana, ALCAM representa un objetivo potencial para la terapia de los cánceres colorrectal y de mama, por lo tanto, este estudio tiene como objetivo clonar y expresar los dominios C2 y V para su uso en planos prácticos. , de diagnóstico y de recuperación. Métodos: En este estudio, la secuencia de los dominios C2 y V se optimizó para la expresión en un huésped procariota utilizando herramientas en línea y se clonó en plásmidos de expresión pET-28a. Las células de E. coli BL21 (DE3) se transformaron con plásmidos recombinantes pET-28a utilizando el método de choque térmico y la expresión de los dominios V y C2 recombinantes se examinan mediante la técnica SDS-PAGE. Resultados: Los genes sintéticos de los dominios C2 y V se localizaron entre los sitios de restricción NcoI/BamHI y XhoI y se clonaron en el vector pBSK (+). La presencia de estos genes en pET28a se analiza por colonia y se confirma mediante digestión de restricción. Los genes de los dominios C2 y V se expresaron en E. coli BL21 DE3. Los resultados de la técnica SDSPAGE confirmaron la expresión de los dominios C2 y V recombinantes de 23 y 29 kDa en un sistema de expresión bacteriano. Conclusiones: Los genes de los dominios C2 y V se expresan como recombinantes en E. coli. Estos fragmentos recombinantes pueden introducirse como candidatos diagnósticos y correctivos para la detección y la terapia del cáncer en pacientes con cáncer colorrectal y de mama.