Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Construcción de un biosensor amperométrico de lactato basado en la inmovilización de nanopartículas de lactato deshidrogenasa sobre un electrodo de grafito tipo lápiz

Vinay Narwal, Kusum Dagar y Pundir CS

Se prepararon nanopartículas (NP) de lactato deshidrogenasa comercial de músculo de conejo, se caracterizaron e inmovilizaron covalentemente sobre un electrodo de grafito de lápiz (PG) para fabricar un biosensor amperométrico de lactato mejorado (LDHNPs/PGE). El biosensor mostró una respuesta óptima en 2,5 s a pH 7,0, temperatura 35 °C, a un potencial aplicado de -0,4 V. La amplia respuesta lineal fue producida por el biosensor con un rango de concentración de ácido láctico (0,001 μM a 45 mM) y corriente (mA) en condiciones óptimas. El electrodo LDHNPs/PGE mostró una alta sensibilidad (2,45 ± 2,0 μA cm−2 μM−1); un límite de detección inferior (0,001 μM) y un buen coeficiente de correlación (R2 = 0,99) con un método colorimétrico enzimático estándar. El estudio de evaluación del biosensor ofreció una buena recuperación analítica del 98,01%, cuando se añadió la concentración de ácido láctico a la muestra de suero. Además, se detectaron coeficientes de variación para el electrodo de trabajo dentro y entre lotes de 0,03% y 0,04%, respectivamente. El biosensor se aplicó para la detección de ácido láctico en el suero de sujetos aparentemente sanos y pacientes afectados por shocks cardiogénicos. Hubo una pérdida del 10% en la actividad inicial del biosensor después de su uso regular durante un período de tiempo de 180 días, mientras se almacenaba a 4 °C.