Revista de bioequivalencia y biodisponibilidad

Abstracto

Determinación de fingolimod en sangre total mediante LC-MS/MS: aplicación al estudio de bioequivalencia

Tawfiq Arafate, Ahmed Abu-Awwad, Basil Arafat, Asaad Shahin, Hadil Alotaibi, Mona Bustami

Se ha desarrollado y validado un nuevo método bioanalítico de cromatografía líquida y espectrometría de masas en tándem para la determinación clínica del clorhidrato de fingolimod en sangre completa. El método se ha aplicado en un estudio de bioequivalencia siguiendo un diseño de etiqueta abierta paralela, una dosis única aleatorizada y dos tratamientos con sujetos varones adultos sanos en ayunas. Se extrajo fingolimod con el estándar interno marcado (IS; Fingolimod-D4) de la sangre humana mediante extracción líquido-líquido y se separó cromatográficamente de su matriz mediante una columna Fortis UniverSil Cyano. El método establecido se validó en un rango dinámico de calibración de 12-1200 pg/ml para sangre enriquecida. En un solo período, cada sujeto de 42 voluntarios sanos recibió una dosis única de 0,5 mg de cápsula de clorhidrato de fingolimod del producto de prueba o de referencia. Se calcularon los parámetros farmacocinéticos de Cmax _, AUC _0–t y Tmax _para fingolimod en sangre del producto de prueba y se compararon con el producto de referencia. Fingolimod e IS se detectaron mediante un modo de escaneo de Monitoreo de Reacción Múltiple (MRM) positivo en un filtro de masa de m/z 308,4 → 255,3 para fingolimod y 312,4 → 259,3 para IS. Todos los resultados de validación estuvieron dentro de los criterios de aceptación de acuerdo con las directrices europeas para métodos bioanalíticos. Los hallazgos actuales de AUC _0-72 , C _max y T _max para Gilenya ^® fueron biocomparables con los parámetros correspondientes derivados del producto de prueba. El método validado se aplicó con éxito en un estudio de bioequivalencia para investigar la cápsula de figolimod de 0,5 mg a partir de sangre humana completa siguiendo un diseño de períodos paralelos.