Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Desarrollo y prueba de muestras de prueba para el serodiagnóstico específico de Fasciola gigantica mediante evaluación de calidad externa

Vu Quang Huy, Tran Thien Trung, Ha Manh Tuan, Vu Chi Thanh, Le Van Chuong, Nguyen Lam Duc Vu, Huynh Thi Diem Phuc, Bui Quang Sang

Objetivo: Construir un procedimiento para la producción de muestras para el serodiagnóstico específico de anticuerpos anti- Fasciola gigantica a través de un esquema de evaluación de calidad externa, y evaluar la homogeneidad y estabilidad de las muestras de ensayo.

Métodos: En este estudio experimental, se recogieron muestras que contenían un anticuerpo anti- Fasciola gigantica según el cribado por ELISA, seguido de confirmación por Western blotting. Todas las muestras fueron analizadas y se encontró que eran negativas para otros helmintos, especialmente para anticuerpos contra trematodos. Las muestras también fueron negativas para anticuerpos anti-VIH-1 y -2, anticuerpos anti-VHC y antígeno HBs. Las muestras se prepararon mediante métodos de liofilización y congelación, la estabilidad y homogeneidad se evaluaron cada 2, 4, 8, 12 y hasta 24 semanas.

Resultados: Producimos tres lotes de muestras de suero que contenían anticuerpos anti- Fasciola gigantica en tres niveles. El lote DK1 tenía una densidad óptica, OD=0,350 ± 0,037; los lotes DK3 y DL3 tenían O=0,653 ± 0,046, y el lote DL1 tenía OD=0,850 ± 0,047 con la longitud de onda de 450 nm. Los anticuerpos IgG específicos contra antígenos de Fasciola gigantica resultaron ser positivos para las tres proteínas, proteína de 8-9 kDa (P 8-9), 28 kDa (P 28) y 42 kDa (P 42) mediante la técnica Western blot. Las muestras de prueba se confirmaron como homogéneas mediante la prueba de Fisher (estadística F 0,05) así como estables durante 24 semanas (con estadística t 0,05).

Conclusión: Se pueden producir muestras de prueba para el serodiagnóstico específico de anticuerpos anti- Fasciola gigantica mediante evaluación de calidad externa con homogeneidad y estabilidad durante 24 semanas mediante métodos de liofilización y congelación.