Pharmaceutica Analytica Acta

Abstracto

Desarrollo y validación de un método LC-MS/MS para la determinación de maleato de trimipramina en plasma humano

Venkata Sairam Koganti, Sekuri Shashidhar Reddy, Jyothigoudapura Channabasappa Thejaswini y Gurupadayya Bannimath

Se desarrolló un método simple y sensible de cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS) para la determinación de maleato de trimipramina en plasma humano utilizando diclorhidrato de opipramol como estándar interno (ISTD). El analito y el ISTD se aislaron del plasma mediante el método de precipitación de proteínas utilizando metanol. La separación cromatográfica se llevó a cabo en una columna ZORBAX ECLIPSE XDB-C18 (4,6 x 150 mm, 5 µm). La elución se realizó con una fase móvil isocrática compuesta por formiato de amonio 5 mM con ácido fórmico al 0,1 % y metanol en una proporción de 25:75 (v/v) a una velocidad de flujo de 1,0 ml/min. Se detectaron trimipramina y opipramol con aductos de protones a m/z 295,20→100,10 y m/z 364,30→171,20 en modo positivo de monitorización de reacción múltiple (MRM) respectivamente. Se encontró que el tiempo de retención de trimipramina e ISTD era de 1,67 min y 1,48 min respectivamente. Las curvas de calibración fueron lineales en un rango de concentración de 0,1 a 100,1 ng/ml. Se encontró que el límite inferior de cuantificación era de 0,1 ng/ml. El método fue validado por las directrices de la EMEA (Agencia Europea de Medicamentos) para linealidad, exactitud y precisión, factor de matriz, recuperación, selectividad y estabilidad. Se encontró que los parámetros de validación estaban dentro del límite de aceptación.