Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

La quinasa tipo doublecotin 1 aumenta la quimiorresistencia de las células de cáncer colorrectal a través de la vía antiapoptosis

Lianna Li, Kierra Jones y Hao Mei

Antecedentes: El cáncer colorrectal (CCR) es el tercer cáncer más común diagnosticado y la segunda causa principal de muertes relacionadas con el cáncer en los Estados Unidos. Se cree que las células madre cancerosas (CSC) son la principal razón de la recurrencia del CCR. El marcador específico de células madre, la quinasa tipo doblecortina 1 (DCLK1), desempeña papeles críticos en la tumorogénesis y la progresión del CCR. La regulación positiva de DCLK1 se correlaciona con un mal pronóstico. No está claro si DCLK1 está correlacionado con una mayor quimiorresistencia de las células del CCR. Nuestro objetivo es revelar la asociación de DCLK1 con la quimiorresistencia de las células del CCR y los mecanismos moleculares subyacentes.

Métodos: Se establecieron células con sobreexpresión de DCLK1 estable (DCLK1+) utilizando células HCT116 (WT). Las células DCLK1+ y WT se trataron con 5-fluorouracilo (5-Fu) en diferentes dosis durante 24 o 48 horas. Se utilizó el ensayo MTT para evaluar la viabilidad celular y se determinó la CI50 de 5-Fu. Se aplicó PCR cuantitativa en tiempo real para determinar la expresión génica de caspasa-3 (casp-3), casp-4 y casp-10. La expresión de casp-3 escindida se investigó mediante Western blot e inmunofluorescencia.

Resultados: Nuestros resultados demostraron que la CI50 de 5-Fu para las células DCLK1+ fue significativamente mayor que la de las células WT tanto para el tratamiento de 24 como de 48 horas (p=0,002 y 0,048 respectivamente), lo que indica una mayor quimiorresistencia de las células DCLK1+. La expresión génica de casp-3, casp-4 y casp-10 se inhibió significativamente en las células DCLK1+ después del tratamiento con 5-Fu en comparación con las células WT (p=7,616e-08, 1,575e-05 y 5,307e-08, respectivamente). La cantidad de casp-3 escindida y las células positivas para casp-3 disminuyeron significativamente en las células DCLK1+ después del tratamiento con 5-Fu en comparación con las células WT (p=0,015).

Conclusiones: En conclusión, nuestros resultados demostraron que la sobreexpresión de DCLK1 mejoró la quimiorresistencia de las células de cáncer colorrectal al tratamiento con 5-Fu al suprimir la expresión génica de caspasas clave en la vía de la apoptosis y la activación de la vía de la apoptosis. DCLK1 puede ser un objetivo terapéutico interesante para el tratamiento eficaz de los pacientes con cáncer colorrectal.