Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Identificación de las principales proteínas de un complejo multiproteico de tejido placentario humano de alta masa molecular muy estable que posee nueve actividades catalíticas diferentes

Evgeniya E Burkova, Pavel S Dmitrenok, Dmitrii V Bulgakov, Evgeny A Ermakov, Valentina N Buneva, Svetlana E Soboleva1 y Georgy A Nevinsky*

La placenta humana es un órgano que protege, alimenta y regula el crecimiento del embrión. Por lo tanto, la identificación y caracterización de los componentes placentarios, incluidas las proteínas y sus complejos multiproteicos, es un paso importante para comprender la función placentaria. Aquí analizamos por primera vez el complejo multiproteico extremadamente estable de la placenta humana (SPC, ~1000 kDa) mediante espectrometría MALDI MS y MS/MS utilizando hidrolizados tripsídicos de proteínas después de la separación de proteínas mediante SDS-PAGE y electroforesis 2-D. La formación de un complejo tan estable debido a la asociación aleatoria de varias proteínas diferentes es muy improbable. Se demostró que los SPC contienen doce proteínas: hemoglobina, fosfatasa alcalina, actina citoplasmática, albúmina sérica humana, hormona somatomamotropina coriónica, proteína de choque térmico beta-1, peroxirredoxina-1, proteína regulada por glucosa de 78 kDa, proteína disulfuro isomerasa A3, serotransferrina, anexina A5 e IgG. Estas doce proteínas tienen en sí mismas muchas funciones biológicas diferentes e importantes, que pueden ser inherentes a estas proteínas en el complejo. Además, el complejo demostró nueve actividades enzimáticas diferentes: DNasa, RNasa, ATPasa, fosfatasa, proteasa, amilasa, catalasa, peroxidasa (dependiente de H2O2) y oxidorreductasa (independiente de H2O2). La eficiencia de la catálisis de cada una de estas reacciones por preparaciones de SPC de tres placentas fue comparable. Se demostró que la hidrólisis de r(pU)23, r(pA)23 y r(pC)23 conduce a la formación de oligonucleótidos de 1-22-mer, mientras que la digestión del microARN mirR137 es específica del sitio (3A-4U > 9U-10A > 8U-9U ≥ 15U-16A) lo que resulta en la formación de solo cuatro productos principales. Se han considerado numerosas funciones posibles del complejo en función de las funciones de sus proteínas individuales. Los avances en el estudio de los complejos proteínicos placentarios pueden contribuir a la comprensión de sus funciones biológicas.