Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Caracterización in vitro de la maquinaria molecular que regula la angiogénesis de células madre mesenquimales de la sangre del cordón umbilical: un paso hacia la terapia con células madre multipotentes para la regeneración vascular

Santiago Roura, Juli R Bagó, Carolina Gálvez-Montón, Jerónimo Blanco y Antoni Bayes-Genis

Las células madre mesenquimales (MSC) derivadas de la sangre del cordón umbilical (UCB) promueven el crecimiento vascular in vivo. Aquí examinamos la maquinaria reguladora intracelular involucrada en el comportamiento angiogénico in vitro exhibido por las UCBMSC. La actividad angiogénica se midió en el ensayo de cultivo estándar basado en Matrigel después del tratamiento de células con moduladores conocidos del factor de respuesta de crecimiento temprano (Egr-3) y la angiogénesis de células endoteliales (EC). La expresión de Egr-3 se evaluó mediante RT-PCR cuantitativa e inmunofluorescencia indirecta, y se anuló específicamente utilizando tecnología de ARN interferente pequeño (siRNA). Mientras que la adición de forbol-12-miristato-13-acetato (PMA) promovió la capacidad angiogénica (P < 0,001), los inhibidores selectivos de PKC/MAPK/ERK anularon esta capacidad (P = 0,016) en las UCBMSC. El tratamiento con PMA aumentó los niveles de ARNm y proteína de Egr-3 (P<0,001). Sin embargo, la ciclosporina A (CsA) y el factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) no afectaron ni los niveles de Egr-3 ni la formación de redes celulares poligonales. PMA también indujo la fosforilación de ERK1/2 , que fue abolida por el inhibidor selectivo U0126 (P=0,021 y P=0,014, respectivamente). Se observó una marcada inhibición de la capacidad de formación de redes en las células transducidas con siEgr-3 (P<0,001). En conjunto, nuestros resultados destacan que Egr-3 participa habitualmente en la maquinaria molecular que regula la angiogénesis de las EC maduras y las MSC multipotentes. Este conocimiento puede aplicarse para aumentar la eficacia terapéutica contra las enfermedades vasculares humanas.