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Abstracto
Aislamiento y secuenciación de los genes Actin1, Actin2 y Tubulin1 implicados en la formación del citoesqueleto en Phytophthora cinnamomi
Ivone M Martins, M Carmen López, Angél Domínguez y Altino Choupina
Los oomicetos del género Phytophthora son patógenos de plantas similares a hongos que son devastadores para la agricultura y los ecosistemas naturales. En la región Nordeste Transmontano (noreste de Portugal), el cultivo del castaño Castanea sativa es extremadamente importante. La mayor reducción de la productividad y el rendimiento se debe a la enfermedad de la tinta, causada por Phytophthora cinnamomi , que es una de las especies de Phytophthora más ampliamente distribuidas , con casi 1000 especies hospedantes. El conocimiento sobre los mecanismos moleculares responsables de la patogenicidad es una herramienta importante para combatir las enfermedades asociadas a este patógeno. Se lograron marcos de lectura abiertos (ORF) completos de los genes act1, act2 y tub1 que participan en la formación del citoesqueleto en P. cinnamomi mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) entrelazada asimétrica térmica de alta eficiencia (HE-TAIL). El gen act1 comprende un ORF de 1128 pb, que codifica una proteína deducida de 375 aminoácidos (aa) y 41.972 kDa. El ORF de act2 comprende 1083 pb y codifica una proteína deducida de 360 aa y 40,237 kDa. tub1 tiene una longitud total de 2263 pb y codifica una proteína de 453 aa con un peso molecular de 49,911 kDa. Los análisis bioinformáticos muestran que actin1 es ortólogo de los genes act1 de Phytophthora infestans, Phytophthora megasperma y Phytophthora melonis; actin2 es ortólogo de los genes act2 de P. infestans, Phytophthora brassicae, P. melonis y Pythium splendens y tubulin1 muestra la ortología más alta con los genes α -tubulina de P. infestans y P. capsici . La estructura 3D analizada de las tres posibles proteínas reveló una conformación espacial muy similar a la descrita para las proteínas ortólogas obtenidas por difracción de rayos X.