Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Los ratones deficientes en la GTPasa Rap1A muestran una adhesión reducida de células hematopoyéticas y estromales mesenquimales pero un potencial de repoblación hematopoyética intacto

Erika Fleck, Stephan Göttig, Harald Kropshofer, Juliane Steinmann, Annette Dorn, Brigitte Rüster, Erhard Seifried, Jürgen Scheele y Reinhard Henschler

Antecedentes: La trifosfatasa de guanina (GTPasa) Rap1A se ha relacionado con la proliferación y migración celular en diferentes tejidos. Sin embargo, su papel en la producción, adhesión y migración de células hematopoyéticas derivadas de la médula ósea no se conoce por completo. Métodos: Analizamos ratones que carecían de uno o ambos alelos Rap1A y medimos su función de adhesión y su capacidad de repoblación hematopoyética utilizando un trasplante de médula ósea competitivo en el modelo de trasplante CD45.1/CD45.2. Además, empleamos citometría de flujo y ensayos de adhesión en cámara de flujo dependientes de la tensión de corte para la caracterización fenotípica y el análisis de las funciones de adhesión. Resultados: Los ratones Rap1A-/- mostraron una disminución en el número de linfocitos y progenitores formadores de colonias hematopoyéticas en la sangre, mientras que el número de granulocitos, monocitos o plaquetas no se alteró significativamente en comparación con los controles. La adhesión inducida por la quimiocina CXCL12 de células de médula ósea con marcadores de linaje depletados (Lin-) a la molécula de adhesión de células vasculares (VCAM)-1 y a la molécula de adhesión intercelular (ICAM)-1 se redujo significativamente en ratones Rap1A-/-. Sin embargo, la repoblación competitiva por células de médula ósea deficientes en Rap1A no fue inferior a la de la médula ósea de tipo salvaje 9 meses después del trasplante. No se observó crecimiento de células estromales mesenquimales (MSC) a partir de la médula ósea de ratones Rap1A-/-, mientras que las MSC Rap1A+/- mostraron una expresión reducida de moléculas de adhesión involucradas en el asentamiento de progenitores y una adhesión deteriorada a células endoteliales primarias y VCAM-1 bajo estrés de corte in vitro, en comparación con sus contrapartes de tipo salvaje. Conclusiones: Rap1A regula la adhesión de células hematopoyéticas inmaduras y células estromales mesenquimales, pero parece ser redundante para el injerto hematopoyético.