Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Preparación de un anticuerpo monoclonal contra saikosaponina C y establecimiento de su ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas

Baoping Qu, Jiayang Sai, Huihua Qu, Shuchen Liu, Jinjun Cheng, Wenchao Shan, Yan Zhao y Qingguo Wang

Se preparó un anticuerpo monoclonal (MAb) 1E11D8 contra saikosaponina c (SSc) mediante una fusión celular con esplenocitos y la línea celular SP2/0 de mieloma de ratón sensible a la hipoxantina-aminopterina-timidina. El MAb anti-SSc 1E11D8 preparado tiene una característica novedosa que muestra una alta especificidad para saikosaponina c, saikosaponina d y saikosaponina a, tres saponinas oleananas principales en Radix Bupleuri. Al utilizar el MAb anti-SSc 1E11D8, se desarrolló un ELISA confiable para la detección de SSc. El sistema muestra un rango de medición completo de 156,25 ng·mL-1 a 2500 ng·mL-1 en el caso de SSc en ELISA competitivo indirecto (icELISA). La ecuación de regresión fue y=-0,283 ln(C) +2,3301 con un coeficiente de correlación de 0,99. La precisión y exactitud del método icELISA se evaluaron mediante las variaciones entre réplicas de pocillo a pocillo (intraensayo) y de placa a placa (interensayo). Los valores obtenidos para estos parámetros estuvieron dentro del rango normal (<10%). Las tasas de recuperación oscilaron entre el 99,82 y el 103,59%. El método ELISA se validó además para su uso en el estudio de la ESC en las prescripciones chinas tradicionales.