Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Producción, purificación y caracterización de endopoligalacturonasa por Bacillus subtillus

Nayab Munir, Javaid Asad M y Haidri SH

La pared celular de la planta está formada por carbohidratos complejos como la celulosa, las hemicelulosas y la pectina. La pectina es un carbohidrato complejo formado por unidades de ácido galacturónico unidas por enlaces glucosídicos. Para la descomposición de esta pectina, los microorganismos requieren muchas enzimas diferentes. La poligalacturonasa es una enzima pectinolítica que cataliza la hidrólisis del enlace glucosídico α 1-4 en el ácido poligalacturónico mediante la adición de agua. La poligalacturonasa tiene dos tipos: endopoligalacturonasa y exopoligalacturonasa. La endopoligalacturonasa cataliza el enlace glucosídico α 1-4 interno y la exopoligalacturonasa cataliza el enlace glucosídico α 1-4 externo en las moléculas de pectato . La endopoligalacturonasa tiene varias aplicaciones, especialmente en las industrias de jugos de frutas, que se utilizan para la clarificación del jugo, así como en la industria alimentaria para la maceración de verduras. El endo-PG producido por hongos funciona en pH ácido y a baja temperatura, pero la aplicación del endo-PG en la industria alimentaria y en la industria textil necesita una enzima que funcione a alta temperatura y también en condiciones alcalinas. Se utilizó Bacillus subtillus como cepa de referencia. Al utilizar diferentes sustratos como cáscaras de manzana, cáscaras de rábano y cáscaras de cítricos, se concluyó que las cáscaras de cítricos producen la máxima concentración de enzima. Una caracterización adicional mostró que el EPG producido por Bacillus subtillus tiene una temperatura óptima de 60 °C y un pH óptimo de 5. El máximo pliegue de purificación se observó con filtración en gel. El peso molecular de la enzima fue de 67 kd. La Vmax para el EPG producido por Bacillus subtillus fue de 1,21 mg/ml y la Km fue de 2423 mol/min/mg.