SIgnacio Del-Valle, Adriana Casao, Rosaura Pérez-Pé, William V Holt, José A Cebrián-Pérez and Teresa Muiño-Blanco
Antecedentes: Uno de los principales inconvenientes del semen refrigerado y congelado-descongelado es la peroxidación lipídica y la consiguiente generación de especies reactivas de oxígeno a partir del metabolismo celular. En este estudio, probamos la hipótesis de que el uso de compuestos antioxidantes mejora la calidad del esperma congelado-descongelado. Analizamos el efecto de diferentes antioxidantes, o aditivos similares a antioxidantes, sobre los procesos involucrados en el enfriamiento y la congelación-descongelación del semen de carnero. Métodos: La motilidad de los espermatozoides, la integridad y estabilidad de la membrana plasmática y el potencial de membrana mitocondrial (PMM) se probaron inmediatamente después de la descongelación y después de la incubación durante 3 h y 6 h a 37 °C. Resultados: La adición de ácido oleico/linoleico no mejoró la viabilidad de los espermatozoides, aunque resultó en un aumento de la motilidad después de la refrigeración y el recalentamiento, similar al encontrado con el ácido pirúvico. En muestras congeladas-descongeladas, el efecto del ácido ascórbico 75 mM fue beneficioso y mejoró la viabilidad, la estabilidad de la membrana, el PMM y la motilidad. El ácido pirúvico, la melatonina, la pinolina y la N-acetilcisteína, o la combinación de ciertos antioxidantes como los ácidos oleico/linoleico con tocoferol, los ácidos lipoico y ascórbico, la melatonina y la pinolina, la N-acetilcisteína y el GSH no mejoraron significativamente la calidad de los espermatozoides congelados y descongelados. Las muestras descongeladas suplementadas con lecitina obtuvieron valores más altos (p<0,001) de integridad y estabilidad de la membrana y de MMP que los controles. Sin embargo, las alteraciones inducidas en la membrana mitocondrial interna dieron como resultado una proporción muy baja de mitocondrias funcionales de manera dependiente del tiempo después de la descongelación. Estos efectos perjudiciales fueron evitados por las proteínas plasmáticas seminales, que mejoraron el efecto protector de la lecitina. Conclusión: Las proteínas plasmáticas seminales reforzaron la capacidad crioprotectora de la lecitina y no solo se mantuvieron bien la viabilidad y la estabilidad de la membrana de los espermatozoides, sino que se preservó la funcionalidad mitocondrial. Importancia general: La lecitina junto con las proteínas del plasma seminal pueden utilizarse como crioprotectores para el semen de carnero.