Revista de bioequivalencia y biodisponibilidad

Abstracto

Estimación simultánea de fluoxetina y norfluoxetina en plasma mediante RP-HPLC empleando derivatización precolumna para mejorar la sensibilidad a los rayos UV

Smita T Kumbhar, Kundan B Ingale Prafulla B Choudhari y Manish S Bhatia

Se describe un método rápido de cromatografía líquida de alto rendimiento para la estimación simultánea del fármaco antidepresivo ampliamente utilizado, fluoxetina, y su principal metabolito, norfluoxetina, en plasma humano. La derivatización precolumna de norfluoxetina se realizó utilizando 4-dimetilaminobenzaldehído (PDAB) para superar las limitaciones de sensibilidad de la norfluoxetina. Después de la extracción líquido-líquido, la separación de los analitos y el estándar interno de la interferencia de la matriz endógena se logró utilizando una columna HIQ sil ODS de fase reversa (250 mm de longitud x 4,6 mm de diámetro interno) KYA TECH (Japón) y se analizó por absorción ultravioleta a 227 nm. La fase móvil isocrática (1 ml/min) compuesta por acetonitrilo: agua: trietilamina: ácido ortofosférico 0,01 M (OPA) (70:30:0,5:2) se utilizó para separar la fluoxetina, la norfluoxetina y el estándar interno, nebivolol. Los tiempos de retención relativos fueron 2,49, 4,24 y 7,29 min para la norfluoxetina, la fluoxetina y el nebivolol, respectivamente. El tiempo de ejecución cromatográfica fue de 10 min y las razones de área de pico de los analitos con respecto al IS se utilizaron para el análisis de regresión de la curva de calibración. Se obtuvo linealidad en el rango de concentración de 10-60 μg/ml para ambas sustancias. Se encontró que el % de recuperación media ± DE era 101,23 % ± 1,0 y 100,69 ± 0,67 para la fluoxetina y la norfluoxetina, respectivamente. El método parece adecuado, en términos de exactitud y precisión, para la determinación de los niveles plasmáticos de fluoxetina del paciente; además, es rápido y sensible.