Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

El potencial angiogénico de las vesículas extracelulares derivadas de células madre mesenquimales adiposas está modulado por el factor de crecimiento básico de fibroblastos

Tatiana Lopatina, Aurora Mazzeo, Stefania Bruno, Ciro Tetta, Natalia Kalinina, Renato Romagnoli, Mauro Salizzoni, Massimo Porta y Giovanni Camussi

Objetivo: El objetivo del presente estudio fue investigar los efectos del factor de crecimiento básico de fibroblastos (bFGF) sobre las propiedades angiogénicas de las vesículas extracelulares (VE) secretadas por células madre mesenquimales derivadas de tejido adiposo (ASC) en cultivo.
Métodos: Aislamos las VE de las ASC (VE-ASC) cultivadas con bFGF (VE-FGF) o sin bFGF (VE-b). Comparamos la acción angiogénica de las VE sobre las células endoteliales microvasculares humanas (CEMH) in vitro mediante un ensayo de formación de estructura similar a capilar e in vivo mediante inyección subcutánea de Matrigel que contenía VEMH en ratones SCID. Analizamos la composición de microARN de las VE mediante una matriz de PCR y seleccionamos dos miARN modificados tras la estimulación con bFGF: miR-223 y miR-21. Transfectamos las CEMH con antisentido corto anti-miR-223 o con miR-21 mimético para compensar la acción de las VE.
Resultados: In vitro, la longitud total y el número de ramificaciones de las estructuras similares a vasos formadas por las HMEC estimuladas con FGF-EV se redujeron significativamente con respecto a la estimulación con b-EV y las estructuras fueron significativamente más grandes que después de la estimulación con b-EV. In vivo, los vasos formados por las HMEC estimuladas con FGF-EV fueron significativamente menores en número con respecto a los formados por las HMEC estimuladas con b-EV, pero fueron significativamente más grandes en tamaño y contenían células positivas para la actina del músculo liso de ratón. Descubrimos que bFGF condujo a cambios moleculares en las ASCEV caracterizados por una expresión reducida de factores angiogénicos . Además, la estimulación con bFGF reguló positivamente la expresión del miR-223 antiangiogénico y disminuyó el nivel del miR-21 proangiogénico. Los efectos de los FGFEV fueron antagonizados por la inhibición de miR-233 y por el imitador de miR-21
Conclusiones: Los resultados indican que las condiciones de cultivo pueden modificar la actividad proangiogénica de las EV derivadas de ASC, cambiando su contenido de proteína y ARN. En particular, el bFGF induce la producción de EV que estimulan la estabilización de los vasos en lugar de un aumento en el número de vasos.