Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Clones de células madre pluripotentes TRA-1-60+, SSEA-4+, Oct4A+ y Nanog+ en carcinomas embrionarios de ovario

Marek Malecki, Mark Anderson, Michael Beauchaine, Songwon Seo, Xenia Tombokan y Raf Malecki

Introducción:
El carcinoma embrionario de ovario (ECO), puro o mezclado con otros tumores, es el cáncer ginecológico mortal.
Objetivo específico: El objetivo específico de este trabajo fue la identificación, el aislamiento, la expansión clonal y el perfil molecular de las células pluripotentes en los carcinomas embrionarios de ovario.
Pacientes y métodos: Las muestras se recogieron de las pacientes, que fueron diagnosticadas clínica e histopatológicamente con el ECO avanzado puro. La preparación de las muestras se inició mediante la selección negativa de las células por MACS, mientras se usaban los scFv superparamagnéticos contra fosfatidilserina (PS) y dsDNA, CD45, CD34, CD19, CD14, y mediante la selección positiva, mientras se usaban los scFv superparamagnéticos para TRA-1-60 y SSEA-4. La visualización de la superficie celular se analizó mediante citometría de flujo (FCM), inmunotransferencia (IB), espectroscopia de fluorescencia multifotónica (MPFS), espectroscopia de resonancia magnética nuclear (NMRS) y espectroscopia de rayos X de reflexión total (TRXFS). Las transcripciones de OCT4A y Nanog se analizaron mediante qRTPCR y MPFS. Las células madre embrionarias pluripotentes humanas (ESC), carcinoma embrionario pluripotente humano de los testículos (ECT), tejidos sanos del ovario (HTO), tejido sano de los testículos, células mononucleares de sangre periférica (PBMC) y células mononucleares de médula ósea (BMMC) sirvieron como controles.
Resultados: Los carcinomas embrionarios del ovario estudiados (ECO) contenían las células con una intensidad significativamente mayor de la visualización de la superficie de TRA-1-60 y SSEA-4, en relación con BMMC, PBMC y HTO, pero similar a la ESC pluripotente y ECT. Su morfología y ultraestructura fueron consistentes con los diagnósticos histopatológicos. Además, estas células expresaron significativamente más fuertemente Oct4A y Nanog, en relación con PBMC, BMMC y HTO, pero similares en relación con las células madre pluripotentes ESC y ECT. Las células ECO formaron cuerpos embrionarios, que se diferenciaron en ectodermo, mesodermo y endodermo. Estas células fueron inducidas a diferenciarse en músculos, epitelios y neuronas.
Conclusión: En este trabajo, revelamos la presencia e identificamos perfiles moleculares de los clones de células madre pluripotentes en los carcinomas embrionarios de los ovarios. Estos resultados deberían ayudarnos a refinar los diagnósticos moleculares de estas neoplasias mortales.