Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Uso de hibridación in situ para localizar Wolbachia durante la embriogénesis en Brugia malayi

Daojun Jiang, Peter U. Fischer y Gary J. Weil

Wolbachia son bacterias intracelulares necesarias para el desarrollo y la reproducción de la mayoría de los nematodos filariales. Se necesitan nuevos enfoques para mejorar la comprensión del papel de Wolbachia en la biología de las filarias. Estudios recientes que utilizan inmunohistología fluorescente revelaron una segregación asimétrica de Wolbachia en embriones tempranos de Brugia malayi, y esto ayuda a explicar la distribución restringida de Wolbachia en gusanos adultos. Sin embargo, la distribución de Wolbachia en etapas tardías del desarrollo embrionario o en larvas infecciosas (L3) es en gran parte desconocida. En este estudio hemos explorado el uso de la hibridación in situ (ISH) para localizar Wolbachia y la expresión génica de Wolbachia durante la embriogénesis y la morfogénesis en B. malayi.

La ISH con una sonda de ARNr 16S reveló Wolbachia en los cordones laterales, ovocitos y embriones de las hembras de B. malayi. Esto fue consistente con estudios previos que detectaron Wolbachia por inmunohistología. La ISH con sondas para el gen de la proteína de superficie de Wolbachia (wsp) y el gen de la vía biosintética del hemo de Wolbachia (hemE) mostró que estos genes se expresaban fuertemente en embriones tempranos pero no en embriones de etapa posterior (microfilarias). intrauterinas “en coma”, “pretzel” o estiradas). Un estudio detallado de la distribución de Wolbachia en embriones de B. malayi utilizando ISH con la sonda de ARNr 16S documentó la segregación asimétrica de Wolbachia en embriones tempranos (mórulas) y mostró que Wolbachia solo estaba presente en células precursoras del cordón hipodérmico en embriones de etapa posterior (etapa “en coma” o posterior). La localización progresivamente restringida de Wolbachia durante la morfogénesis puede explicar por qué Wolbachia está ausente del primordio genital en L3.

La distribución y la expresión génica de Wolbachia varían drásticamente durante el desarrollo embrionario de la filaria ya lo largo del ciclo de vida del gusano. Se necesitan más investigaciones para comprender la dinámica de la población específica de tejidos de Wolbachia y para explorar cómo las señales del huésped nematodo podrían influir en el crecimiento, la distribución y la expresión génica de estas bacterias.