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Abstracto
PCR anidada de alta sensibilidad para la detección de Toxoplasma gondii en muestras de animales y alimentos
Maria Vitale, Paola Galluzzo, Vittoria Currò, Kataryna Gozdzik, Domenico Schillaci y Vincenzo Di Marco Lo Presti
Toxoplasma gondii es un parásito importante que se transmite por los alimentos y el agua en todo el mundo. Los tejidos y las muestras de carne de muchos animales de sangre caliente pueden contener quistes tisulares de toxoplasmosis crónica. El agua y las verduras pueden estar contaminadas por los ooquistes del parásito que se desprenden a través de las heces de los gatos infectados, que representan el huésped definitivo del parásito.
Se describe una PCR sensible para la detección de Toxoplasma gondii. El primer paso amplificó la región entre el rDNA 28S y 18S en T. gondii y Neospora caninum, dos parásitos estrechamente relacionados; el análisis RFLP distinguió el ADN de los dos parásitos morfológicamente idénticos. Aunque N. caninum no está involucrado en la transmisión humana, hasta el momento es importante para la salud animal ya que es uno de los principales responsables de abortos en el ganado.
La PCR anidada se utilizó en un ensayo de dilución en muestras de salchichas de cerdo enriquecidas con ADN parasitario de T. gondii. El análisis mostró que se pudieron detectar hasta 200 fg equivalentes a dos parásitos individuales. Se puede obtener un límite de detección similar para T. gondii con PCR en tiempo real, pero los métodos en tiempo real necesitan consumibles especiales y equipos costosos.