Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Un método simple de detección visual del virus del Zika humano mediante amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa

Yang Li1,2, Zhenzhou Wan3, Yi Zhou2,4, Xia Jin5, Haifeng Shi1* y Chiyu Zhang 2*

El virus del Zika (ZIKV) es un patógeno emergente transmitido por mosquitos y pertenece a la familia Flaviviridae, género Flavivirus. La infección por ZIKV se asoció con microcefalia e infertilidad masculina. La vigilancia de la infección por ZIKA es importante para la salud reproductiva humana y el control de la propagación del virus. El desarrollo de un ensayo rápido y sensible para la detección del ZIKV es urgente en China y otros países del sudeste asiático. Aquí, desarrollamos un ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa (RT-LAMP) de un solo paso y en un solo tubo para la detección del ZIKV. El ensayo tiene un límite de detección (LOD) de 88 copias de ARN del Zika por reacción de 25 μl y se puede completar en 20 minutos cuando la entrada de plantilla es mayor que el LOD. Además, exhibe alta especificidad y buena reproducibilidad. Es importante destacar que el resultado se puede visualizar mediante cambio colorimétrico cuando se utiliza HNB o calceína. Para evaluar la viabilidad del ensayo, se realizó una comparación entre el ensayo RT-LAMP y un RT-qPCR más conversivo utilizando 20 sobrenadantes de cultivos celulares y tres muestras de orina. El ensayo RT-LAMP para el virus del Zika mostró una concordancia perfecta en la detección con el RT-qPCR. Estos resultados demuestran que el ensayo RT-LAMP para el virus del Zika desarrollado recientemente es simple, rápido y adecuado para la vigilancia del virus del Zika, especialmente en regiones con recursos limitados.