Revista de bioequivalencia y biodisponibilidad

Abstracto

Un enfoque sistemático para superar el efecto de matriz durante el análisis LC-ESI-MS/MS mediante diferentes técnicas de extracción de muestras

Chinmoy Ghosh, Shashank Gaur, Chandrakant P. Shinde y Bhaswat Chakraborty

El efecto de la matriz (EM) es una preocupación importante durante cualquier análisis LC-ESI-MS/MS. Afecta la reproducibilidad, sensibilidad y confiabilidad de estas técnicas analíticas. Sin embargo, no hay enfoques estandarizados disponibles para superar los problemas relacionados con el EM. El enfoque varía de molécula a molécula. Aquí examinamos que la técnica de extracción de muestras es un enfoque para superar el EM durante el bioanálisis LC-MS/MS. Se utilizaron tres tipos de técnicas de extracción convencionales, es decir, precipitación de proteínas, extracción líquido-líquido y extracción en fase sólida (SPE) durante la extracción de nevirapina del plasma humano. Se observó que la muestra de nevirapina cuando se prepara por SPE, elimina o reduce drásticamente los EM ipso facto. Las muestras precipitadas de proteínas mostraron el mayor grado de EM con un factor de matriz promedio de 0,30; la extracción líquido-líquido tuvo un factor de matriz promedio de 0,80; y el factor de matriz obtenido por extracción en fase sólida fue 0,99. Se identificaron diferentes fosfolípidos realizando el escaneo de iones precursores a m/z 104 y 184, que interferían con el analito durante la elución cromatográfica. A partir del experimento, se observó que los fosfolípidos retenidos durante mucho tiempo tenían un papel significativo en la ME. Por lo tanto, es una buena práctica observar los fosfolípidos durante el escaneo de precursores durante un período que sea al menos tres veces el tiempo de ejecución analítica real. Entre todas las técnicas de extracción aplicadas, la extracción en fase sólida produce la muestra más limpia y la precipitación con metanol produce la muestra más sucia debido a la alta solubilidad de los fosfolípidos en ella.