Revista de trastornos sanguíneos y transfusiones

Abstracto

La unión del factor VIII a nanodiscos lipídicos aumenta su función de coagulación en un modelo murino de hemofilia A

Keri Csencsits-Smith, Krill Grushin y Svetla Stoilova-McPhie

Antecedentes: La hemofilia A es un trastorno hemorrágico congénito causado por un defecto o deficiencia del factor VIII (FVIII). La forma activa del FVIII es el cofactor de la serina proteasa factor IXa (FIXa) en el complejo de tenasa intrínseca unida a la membrana (FVIIIa-FIXa). El ensamblaje del complejo FVIIIa-FIXa en la superficie de las plaquetas activadas es fundamental para la coagulación sanguínea exitosa.

Objetivos: Caracterizar el papel de los nanodiscos lipídicos (ND) en la función del FVIII in vivo y probar el ND lipídico como un sistema de administración de FVIII. Evaluar el potencial de la unión del FVIII recombinante al ND como tratamiento mejorado para la hemofilia A.

Métodos: Se expresó y caracterizó el FVIII porcino recombinante (rpFVIII) en solución y cuando se unió a ND. Los complejos rpFVIII, ND y rpFVIII-ND se caracterizaron mediante microscopía electrónica de transmisión. Se llevaron a cabo estudios funcionales utilizando pruebas de TTPa y estudios de corte de cola con resolución temporal de ratones hemofílicos.

Resultados: El rpFVIII funcional se ensambló con éxito en el lípido ND. Cuando se inyectaron en ratones hemofílicos, los complejos rpFVIII-ND mostraron un efecto procoagulante pronunciado, que fue más fuerte que el del rpFVIII solo. Si bien la inyección del ND solo mostró un efecto procoagulante, este efecto no fue aditivo, lo que implica que los complejos rpFVIIIIND tienen un efecto sinérgico en el proceso de coagulación en ratones hemofílicos.

Conclusiones: La unión del rpFVIII a la ND antes de su inyección en ratones hemofílicos mejora significativamente la función terapéutica de la proteína. Esto representa un paso significativo hacia un nuevo enfoque para modular la coagulación sanguínea a nivel del FVIII unido a la membrana y el ensamblaje del complejo de tenasa intrínseca.