Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

La sangre obtenida mediante gotas de sangre seca (DBS) muestra un metabolismo ex vivo reducido en comparación con la sangre completa mediante el uso de un enfoque metabolómico de marcaje cinético de isótopos

Collin Hill, Jeremy Drolet, Mark D Kellogg, Vladimir Tolstikov, Niven R Narain y Michael A Kiebish

La sangre es la matriz principal para la elaboración de perfiles de metabolitos, lo que proporciona un medio para la identificación de biomarcadores, el análisis farmacocinético/farmacodinámico y el seguimiento de enfermedades. Las metodologías convencionales de recolección de muestras de sangre requieren la extracción de sangre mediante punción venosa. Sin embargo, esta técnica permite la actividad metabólica residual ex vivo de la matriz sanguínea, lo que presenta un desafío para capturar una lectura fisiológicamente representativa del metaboloma. La sangre que no se procesa inmediatamente se somete a períodos prolongados de metabolismo ex vivo. Incluso cuando las muestras se transportan en almacenamiento en frío, algunos procesos enzimáticos permanecen activos. La técnica de recolección de gotas de sangre seca (DBS) hace que las células se vuelvan metabólicamente inactivas en un corto período de tiempo. Demostramos que la sangre completa depositada en una tarjeta DBS disminuye la captación y el metabolismo de U13C-glucosa después de 4 horas, según se analiza por espectrometría de masas. Las células tampoco muestran actividad metabólica adicional durante hasta 24 horas, mientras que la sangre almacenada en un tubo de recolección continúa captando y metabolizando activamente U13C-glucosa hasta 24 horas después de la recolección. Dado que la glucólisis es una de las vías más activas en las células sanguíneas, la capacidad de detener el metabolismo de la glucosa en un corto período de tiempo es importante para capturar con precisión el perfil de metabolitos en el momento de la recolección. Afirmamos que esto probablemente se extiende más allá del metabolismo de la glucosa, ya que las células sanguíneas son capaces de absorber otros nutrientes extracelulares. Creemos que la recolección de sangre mediante la técnica de DBS ofrece una lectura informativa del metaboloma, en comparación con la recolección de sangre convencional, lo cual es fundamental para la salud de la población y las aplicaciones de medicina de precisión.