Revista de ciencia y tecnología de membranas

Abstracto

Investigación de la interacción de la proteína del factor XII con el estrato córneo humano mediante imágenes de terahercios sin cámara

Zia Shariat-Madar, Aunik Rahman, Bozena Michniak-Kohn, Guacyara Da Motta, Anis Rahman*

En este artículo se informa sobre el uso de una técnica de obtención de imágenes de terahercios sin cámara para medir los cambios conformacionales del factor XII zimógeno (FXII) en solución y tras su unión al estrato córneo en ausencia de su conocido complejo potenciador endógeno, el quininógeno de alto peso molecular (HK)-precalicreína (PK) en tiempo real. El FXII se sintetiza en el hígado y se secreta en la circulación para actuar como factor de coagulación sanguínea. El FXII tiene diversas funciones biológicas. En primer lugar, actúa como molécula accesoria para extender la generación de adhesión plaquetaria inducida por trombina a la monocapa plaquetaria formada inicialmente. En segundo lugar, el FXII proporciona un estímulo robusto para la hiperpermeabilidad inducida por bradicinina (BK) al alterar las barreras vasculares. Mediante ensayos in vitro, los estudios han demostrado que la activación del FXII puede ocurrir en superficies con carga negativa. Esta activación se acelera en presencia de calicreína o precalicreína (PK) activada. Demostramos nuestro método midiendo los cambios conformacionales que ocurren tras la unión del FXII al estrato córneo. El tema de la activación del FXII sigue siendo un trabajo en progreso. Anteriormente, se utilizó la reflectometría de barrido de terahercios (TSR) y la espectrometría de terahercios (TS) para demostrar que las diferentes desviaciones de densidad espectral de la señal se deben a las alteraciones estructurales y la activación del FXII inducidas por el estrato córneo hidratado. El presente trabajo utiliza imágenes de terahercios (THz) para demostrar que un subconjunto del zimógeno FXII se une al estrato córneo. El FXII no se acumuló significativamente en el estrato córneo hidratado. Sin embargo, se observó FXII activado formado (FXIIa) en el estrato córneo. Este hallazgo sugiere que la superficie cargada negativamente no es una condición necesaria.