Revista de Investigación y Desarrollo Acuícola

Abstracto

ADNc que codifica la quitina sintasa del camarón (Pandalopsis japonica): caracterización molecular y análisis de expresión

Sr. Hasan Uddowla, Sr. Ah Ran Kim, Sr. Won-gyu Park, Sr. Hyun-Woo Kim*

El crecimiento de los crustáceos se produce a través de la muda, el desprendimiento periódico del exoesqueleto. Comprender los genes involucrados en el metabolismo de la quitina asociado con el ciclo periódico de muda es importante para diversas aplicaciones en la acuicultura de crustáceos decápodos. La quitina sintasa es una enzima importante en la vía biosintética de la quitina que desempeña un papel importante en la síntesis de nueva cutícula después de la muda. En este estudio, aislamos un ADNc de longitud completa que codifica la quitina sintasa (PajCHS) de Pandalopsis japonica a través de una combinación de clonación basada en PCR (reacción en cadena de la polimerasa) y análisis bioinformático. La PajCHS identificada codifica una proteína transmembrana con 1525 residuos de aminoácidos (175 kDa). La comparación con otros CHS de insectos reveló que PajCHS contiene tres dominios: dominio A N-terminal, dominio catalítico B y dominio C-terminal C. Tres motivos conservados (EDR, QRRRW y SWGTR) también estaban bien conservados dentro y cerca del dominio catalítico B, lo que sugiere que Paj-CHS es funcionalmente activo. La variación en la hélice transmembrana dentro de los dominios N-terminal y C-terminal sugirió que la orientación de cada CHS puede ser diferente. El análisis filogenético sugirió que PajCHS es un ortólogo de los miembros del grupo CHS1 de especies de insectos. Sin embargo, los perfiles de expresión tisular indicaron que la epidermis, el hepatopáncreas, el intestino y las branquias fueron los principales sitios de producción de la transcripción de PajCHS, que es considerablemente diferente de CHS1 de insectos. Los resultados de qPCR mostraron que la ablación del tallo ocular y la inyección de 20 hidroxiecdisona (20E) aumentaron el nivel de expresión del ARNm de PajCHS, lo que sugiere que la expresión de PajCHS1 puede estar controlada por 20E endógeno.