Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Caracterización de marcadores de superficie de carbohidratos en células madre embrionarias de ratón

Zhenwei He, Yue An, Gang Shi, Yingwei Lin, Jiliang Hu y Yali Li

Se ha demostrado que la glicosilación de proteínas y lípidos en la superficie celular es importante para mantener la pluripotencia y el destino de las células madre embrionarias. Las lectinas se han utilizado ampliamente para caracterizar las modificaciones de carbohidratos en la superficie celular de las células madre embrionarias para determinar la pluripotencia y el destino de las células madre. En el presente estudio, se utilizó un panel de 14 lectinas y anticuerpos de carbohidratos para caracterizar los marcadores de superficie de carbohidratos de células madre embrionarias (ES) de ratón. Las células ES de ratón positivas para SSEA-1 se enriquecieron primero y el perfil de carbohidratos de las células se determinó por citometría de flujo e inmunocitoquímica. El enriquecimiento de células ES de ratón produjo aproximadamente 99,95 ± 0,87% de células ES de ratón positivas para SSEA-1. Se observó un porcentaje alto y uniforme de unión para PNA, DSL, JAC, GNL, PSA y LTL, con PNA, DSL, JAC y GNL teniendo un porcentaje similar de unión a SSEA-1 (99,9%), mientras que la unión de PSA y LTL fue de aproximadamente 95%-99%. Se observó una unión parcial de WFL, SNA y AAL en células ES de ratón que también se reflejó en las respectivas imágenes de inmunocitoquímica. Se observó un porcentaje muy bajo de unión para MAA y UEAI. Los datos mostraron que hay una alta expresión de manosa, N-acetil-lactosamina y galactosa en la superficie celular de las células ES de ratón. Algunos marcadores de superficie confiables que se pueden usar para determinar la pluripotencia son PNA, DSL, JAC y GNL, que mostraron una unión similar a SSEA-1, un marcador pluripotente bien establecido. Tomados en conjunto, los datos han proporcionado información sobre el perfil de carbohidratos de la superficie celular de las células ES de ratón.