Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Diferenciación condrógena de células madre derivadas de tejido adiposo mediante estimulación eléctrica por radiofrecuencia

María Luisa Hernández-Bule, María Ángeles Trillo, María Ángeles Martínez-García, Carlos Abilahoud y Alejandro Úbeda

Objetivo: Aunque las terapias de transferencia eléctrica capacitiva-resistiva (CRET), basadas en la aplicación transdérmica de corrientes de radiofrecuencia electrotérmica, han demostrado una eficacia terapéutica prometedora en la regeneración de lesiones tisulares traumáticas o degenerativas, sus efectos potenciales en tejidos como el cartílago, que tienen capacidades regenerativas pobres, no se han estudiado suficientemente. Aquí investigamos los efectos de la exposición a una corriente de 448 kHz utilizada típicamente en la terapia CRET, en la diferenciación condrógena temprana de células madre humanas derivadas de tejido adiposo (ADSC).

Materiales y métodos: Las células madre obtenidas de donantes sanos se diferenciaron en medio condrogénico durante 16 días. Durante los últimos 2 días de incubación, los cultivos fueron expuestos intermitentemente o simuladamente a una corriente sinusoidal de 448 kHz, administrada a una densidad subtérmica de 50 μA/mm2 ^. La respuesta celular se evaluó mediante: ensayo de proliferación XTT, cuantificación de glicosaminoglicanos (GAG) y colágeno (análisis de imagen, ensayo Blyscan e inmunoblot) y análisis de la expresión de los factores condrogénicos Sox5 y Sox6, y del factor de transcripción ERK1/2 y su forma activa p-ERK1/2 (inmunoflorescencia, inmunoblot y RT-PCR).

Resultados: El estímulo eléctrico aumentó significativamente los niveles de colágeno tipo II específico del cartílago y de GAG ​​en la matriz extracelular de los cultivos diferenciadores. Aunque no se observaron cambios en la expresión de los genes SOX al final del tratamiento de 48 h, el estímulo indujo una sobreexpresión significativa de los factores de transcripción L-Sox5, Sox6 y p-ERK1/2. Dado que estas proteínas son reguladores cruciales de la síntesis de la matriz extracelular durante la diferenciación condrógena, es probable que su sobreexpresión esté implicada en los aumentos observados en el contenido de colágeno extracelular y GAG.

Conclusión: El presente conjunto de datos respalda la hipótesis de que el componente eléctrico del tratamiento electrotérmico aplicado en terapias CRET podría estimular la reparación del cartílago al promover la diferenciación condrógena. Estos datos, junto con resultados informados previamente de que el tratamiento in vitro con el mismo tipo de señal eléctrica subtérmica promueve la proliferación de ADSC indiferenciadas, identifican fenómenos moleculares subyacentes a los posibles efectos reparadores y regenerativos de dichas corrientes de radiofrecuencia.