Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Comparación de DAC-ELISA e inmunoensayo de transferencia de tejido para la detección de Acidovorax avenae subsp. avenae, agente causal de la franja roja de la caña de azúcar

Syed Zia-Ul-Hussnain, Rauf CA, Haque MI, Shahid Afghan, Tariq Mukhtar, Farah Naz, Kausar Nawaz Shah M y Aamir Shahazad

Se compararon el inmunoensayo ligado a enzimas con recubrimiento de anticuerpos directos (DAC-ELISA) y el inmunoensayo de transferencia tisular (TBIA) para la detección de Acidovorax avenae subsp. avenae (Aaa) en muestras de caña de azúcar estudiadas en 2010 y 2011. Un total de 27 clones de caña de azúcar contenían dos muestras de plantas sintomáticas, que se analizaron simultáneamente mediante ambas pruebas serológicas. Los resultados obtenidos de las pruebas DAC-ELISA mostraron que 11 de las 27 muestras analizadas de clones de caña de azúcar estaban infectadas con Aaa y 16 estaban libres de bacterias; mientras que, en las muestras duplicadas, solo 7 muestras fueron positivas para Aaa utilizando el TBIA. Las membranas TBIA mostraron un color de tinción azul oscuro en las 7 positivas y 20 en las negativas. Se concluyó que el DAC-ELISA tuvo falsos positivos en los 4 clones (SPF-238, CP77-400, SPF-213 y GT-11) que fueron negativos usando TBIA. El tiempo de ensayo también se minimizó al realizar la prueba TBIA como equivalencia a DAC-ELISA. En relación con el tiempo de realización de la prueba, se consumieron al menos 25-30 horas para completar el ensayo DAC-ELISA, mientras que solo se requirieron 6-9 horas para el ensayo TBIA con resultados confiables. Ambos ensayos dieron Aaa positivo para los clones HoSG-315, CPSG-437, NSG-49, CPSG-2453, CP-NIA-82-223, CSSG-2402 y US-114. Las pruebas TBIA fueron distintas con resultados positivos y negativos claros con un error de diagnóstico mínimo. Por otra parte, el ensayo cuantitativo de bacterias es una característica importante del DAC-ELISA, pero las lecturas de densidad óptica bajas por encima del fondo no eran coherentes con el TBIA y se consideraban resultados falsos positivos. Entre la variedad de pruebas inmunológicas disponibles en Pakistán, el inmunoensayo de transferencia de tejido (TBIA) es el más útil para detectar infecciones latentes en los materiales vegetales.