Bioquímica y Bioquímica Analítica

Abstracto

Inmovilización covalente de la lactato oxidasa sobre nanopartículas de sílice recubiertas de zirconio/película híbrida de quitosano para la determinación amperométrica de lactato

Kusum Dagar y Pundir CS

Se construyó un biosensor amperométrico mejorado de L-lactato basado en la inmovilización covalente de la lactato oxidasa (LOx) sobre nanopartículas de sílice recubiertas de zirconia (SiO2@ZrONPs)/quitosano (CHIT) electrodepositadas en la superficie de un electrodo de oro (AuE). El electrodo enzimático se caracterizó por voltamperometría cíclica (CV), microscopía electrónica de barrido (SEM), espectroscopía infrarroja por transformada de Fourier (FTIR) y espectroscopía de impedancia electroquímica (EIS), mientras que las SiO2@ZrONPs se sintetizaron por el método de reducción química y se caracterizaron por microscopía electrónica de transmisión (TEM), espectroscopía UV y difracción de rayos X (XRD). El biosensor mostró una respuesta óptima en 3 s a pH 7,5 en tampón de fosfato de sodio 0,05 M y 30 °C, cuando se operó a 20 mVs-1. El biosensor tenía un límite de detección bajo de 0,2 nM con un amplio rango de trabajo/lineal entre 0,1 y 4000 μM. El biosensor se empleó para la medición del nivel de ácido L-láctico en plasma de personas aparentemente sanas y enfermas. La recuperación analítica de ácido láctico añadido (5,0 mM y 10,0 mM) en plasma fue del 99% y del 96,6% respectivamente. Los coeficientes de variación dentro y entre lotes fueron del 1,79% y del 2,89% respectivamente. Hubo una buena correlación (R2=0,99) entre los valores de lactato plasmático medidos mediante el método espectrofotométrico enzimático estándar y el presente biosensor. El electrodo enzimático se utilizó 160 veces durante un período de 120 días, cuando se almacenó seco a 4 °C.