Bioquímica clínica y médica

Abstracto

Detección y caracterización molecular de células tumorales circulantes (CTC) en pacientes con melanoma metastásico: una posible aplicación de la biopsia líquida

Suresh M. Kumar

Anticuerpo anti NG2 específico para melanoma conjugado con nanopartículas de óxido de hierro que se han desarrollado para aislar, detectar y cultivar CTC de modelos de xenoinjerto de melanoma y sangre de pacientes con melanoma metastásico. El proceso de enriquecimiento implicó la lisis de glóbulos rojos de muestras de sangre utilizando un tampón de lisis de glóbulos rojos que mejora la recuperación de células cancerosas mediante el etiquetado y la separación inmunomagnéticos. La captura celular eficiente se validó utilizando células cancerosas marcadas con fluorescencia agregadas a sangre humana sana y se demostró la utilidad clínica en muestras de pacientes con melanoma metastásico. El experimento de adición da como resultado una recuperación superior al 70 % en cuatro conjuntos experimentales. Modelo de melanoma con metástasis espontánea, se encontró que la cantidad de CTC aumentó durante la progresión del tumor y se correlacionó con el desarrollo de metástasis linfática y pulmonar in vivo. Se detectaron CTC en 6 de 7 muestras de sangre de pacientes que contenían melanoma metastásico. Las CTC fueron positivas para marcadores moleculares específicos de melanoma como S100, HMB45, MelaA, MITF y las CTC fueron positivas para tinción anti NG2-Q-dot y pERK2-Q-dot. El patrón de expresión del gen BRAFV600e resultó en que las CTC se expresaron BRAFV600e de manera similar a las células de melanoma de control. El método de aislamiento de nanopartículas de anticuerpos de óxido de hierro es un método de detección altamente confiable y rentable de CTC de pacientes con melanoma metastásico y las células CTC se pueden cultivar para estudios analíticos adicionales o pruebas de sensibilidad potencial a medicamentos.