Farmacología cardiovascular: acceso abierto

Abstracto

Detección de células endoteliales circulantes inflamatorias utilizando células endoteliales de la vena umbilical humana desprendidas de placas de cultivo por el factor de necrosis tumoral alfa como células de control

Junpei Tochikubo, Naoyuki Matsuda, Yoshimi Ota, Tomoko Higashi, Yudai Takatani, Masato Inaba, Yushi Adachi y Norihiko Shiiya

Antecedentes: El síndrome de respuesta inflamatoria sistemática (SIRS) con coagulación intravascular diseminada (CID) es un trastorno grave en pacientes críticos y está estrechamente relacionado con la progresión de la lesión endotelial vascular. Se requiere un diagnóstico temprano para prevenir la progresión de la disfunción orgánica. Las células endoteliales circulantes (CEC) podrían aumentar en la lesión endotelial vascular y desempeñar un papel importante en el diagnóstico de CID. Sin embargo, el método de detección de CEC no se ha estandarizado. Este estudio tuvo como objetivo establecer un método para la detección de CEC en un entorno de cuidados críticos. Usamos células endoteliales de la vena umbilical humana (HUVEC) desprendidas de placas de cultivo por factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α) como células de control para CEC.
Métodos: Las HUVEC cultivadas se incubaron en medio con TNF-α (100 ng/mL), y las células desprendidas de placas de cultivo después de 24 h se usaron como TNF-HUVEC. Las moléculas de la superficie celular de HUVEC normales, TNF-HUVEC y células sanguíneas se analizaron mediante citometría de flujo (FC) para buscar marcadores apropiados para detectar CEC. Se añadieron HUVEC normales y TNF-HUVEC a la sangre y se detectaron mediante FC y el método de inmunoesferas (IB) para comparar dos métodos. Se midieron CEC en voluntarios sanos y pacientes de la unidad de cuidados intensivos (UCI) mediante FC.
Resultados: CD146 y CD105 se expresaron en gran medida en HUVEC y fueron superiores para la separación de UVEC de las células sanguíneas completas. Las tasas de detección medias de HUVEC normales fueron del 75% en FC y del 82% en IB. Sin embargo, las tasas de detección medias de TNF-HUVEC fueron del 64% en FC y del 27% en IB (p < 0,05). Los recuentos medios de CEC de 20 voluntarios sanos y 16 pacientes de la UCI fueron de 2,8 células/ml y 4,3 células/ml, respectivamente. En un paciente de UCI con CID inducida por SIRS, los niveles de CEC aumentaron en 49 células/ml.
Conclusión: CD146 y CD105 son adecuados para detectar células endoteliales en sangre. FC es superior a IB para detectar células endoteliales en estados inflamatorios graves.