Pharmaceutica Analytica Acta

Abstracto

Desarrollo y validación de un método de cromatografía líquida de alta presión con indicador de estabilidad para la determinación de prostaglandina E1 y sus productos de degradación en una formulación intracavernosa de sn

Victoire Vieillard, Ghorbel N, Deffaux C, Astier A, Yiou R y Paul M

Se desarrolló una nueva formulación intracavernosa para superar el fracaso de los tratamientos estándar de la disfunción eréctil después de la prostatectomía radical. Esta formulación contiene prostaglandina E1 (pGE1) a 15 μg/ml en asociación con papaverina y urapidil a 15 mg/ml y 2,5 mg/ml respectivamente. Dado que pGE1 fue el principal compuesto sujeto a degradación fisicoquímica, su degradación y la aparición concomitante de su producto de degradación prostaglandina A1 (pGA1) se correlacionan con la estabilidad de la formulación. La baja absorbancia específica de PGE1 en la región ultravioleta y la presencia de altos niveles de papaverina y urapidil en la formulación fueron las principales dificultades para desarrollar un nuevo método para la determinación simultánea de pGE1 y pGA1. Se estudiaron muchas composiciones y pH de la fase móvil para encontrar las mejores condiciones cromatográficas, y el método elegido es un método de ensayo de cromatografía líquida de alto rendimiento en fase reversa con rampa (RP-HPLC) sensible, preciso y exacto. La separación por RP-HPLC en rampa se logró en una columna Kromasil 5 C18 (250×4,6 mm de diámetro interior, tamaño de partícula de 5 μm) utilizando una fase móvil compuesta por un tampón de fosfato de acetonitrilo pH 3 (37 : 63 %, v/v). La detección se realizó a 205 y 230 nm para PGE1 y pGA1 respectivamente, utilizando un detector UV multionda. El método se validó para determinar su especificidad, linealidad, precisión, exactitud, robustez y sensibilidad. Los límites de cuantificación fueron de aproximadamente 3 μg/ml para pGE1 y 0,5 μg/ml para pGA1. La presencia de urapidil y papaverina en alta concentración no interfirió en la determinación de pGE1 y pGA1 en la formulación. El método desarrollado, que separa la mayoría de los productos de degradación formados en una variedad de condiciones, fue sensible, selectivo, lineal, preciso y exacto, y por lo tanto se puede utilizar para estudiar la estabilidad de la formulación.