Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Desarrollo de una PCR anidada en tiempo real sensible para el diagnóstico de las fases aguda y crónica de la toxoplasmosis en un modelo de ratón

Parisa Mousavi, Hossein Mirhendi, Hossein Keshavarz Valian, Saeedeh Shojaee, Shirzad Fallahi, Armin Farhang, Mohammad-Ali Mohaghegh y Rasool Jafari

Toxoplasma gondii es un parásito intracelular que causa una variedad de manifestaciones clínicas. Las fases aguda y crónica de la toxoplasmosis se consideran como la presencia de taquizoítos que proliferan activamente en las células nucleadas de huéspedes mamíferos como los humanos, y se propagan a través de la sangre a otras partes del cuerpo, que posteriormente forman quistes tisulares. El presente estudio tuvo como objetivo evaluar el valor diagnóstico de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) anidada en tiempo real para las fases aguda y crónica de la toxoplasmosis en los ratones de laboratorio utilizando PCR en tiempo real convencional. Para inducir la toxoplasmosis aguda, se inocularon intraperitonealmente 103 taquizoítos de la cepa RH de Toxoplasma gondii a 25 ratones BALB/c. Para inducir la toxoplasmosis crónica, los ratones fueron infectados subcutáneamente por el parásito y luego tratados con sulfadiazina desde el día uno hasta el día 14 después de la inyección. El ADN genómico se extrajo de la sangre y los tejidos cerebrales. Se realizó PCR en tiempo real y PCR en tiempo real anidada dirigida al elemento repetido (RE) de 529 pb. Todos los ratones con infección aguda fueron positivos para Toxoplasma gondii usando PCR en tiempo real anidada y 21 fueron positivos mediante PCR en tiempo real. En la fase crónica, todas las muestras de sangre fueron negativas con PCR en tiempo real y tres fueron positivas usando PCR en tiempo real anidada. Sin embargo, de las 25 muestras de cerebro, el 28%, el 52% y el 72% fueron positivas con los métodos de PCR en tiempo real, microscópica y anidada, respectivamente. Los resultados del presente estudio mostraron que los métodos moleculares tienen una alta sensibilidad para el diagnóstico de toxoplasmosis aguda. En la fase crónica, una muestra de sangre no es adecuada para la detección de la infección, y se pueden utilizar otras muestras de tejido en su lugar. Además, la PCR en tiempo real anidada tiene una sensibilidad incluso mayor en comparación con la PCR en tiempo real convencional.