Revista de tecnología microbiana y bioquímica

Abstracto

Diabético tipo II relacionado con anemia

Luljeta Hetemi

Introducción:

El propósito de este estudio fue: dar seguimiento a pacientes con diabetes tipo ll mediante pruebas de: derivados de hemoglobina glucosilada (HbA1c), pero la importancia del método HPLC durante las pruebas de HbA1c en: diagnóstico, monitoreo, seguimiento, acceso a la terapia de diabetes tipo ll también se obtuvieron resultados de: diabetes, prediabetes, inserción de insulina en el paciente, monoterapia, pero también hallazgos de formas anormales de HgB en pacientes diabéticos, como hemoglobinopatías, y durante la investigación encontramos que la orientación diagnóstica a través de una prueba de HbA1c con HPLC está en algunas patologías, que era tanto preventiva como diagnóstica en otras patologías. La investigación duró más de 1 año en el centro de diagnóstico médico y de laboratorio Olive.

Método:

HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento) G8 Tosoh, distribuidor exclusivo de Keis Group Pharmaceutical Kosovo. Por primera vez en nuestro país, realizamos la determinación de HbA1c con HPLC. El analizador G8 es la próxima generación de los principales sistemas de análisis HPLC de Tosoh para obtener resultados de HbA1c rápidos y precisos. El analizador diluye la muestra de sangre completa con solución de hemólisis y lavado y luego inyecta un pequeño volumen de la muestra tratada en la columna variante TSKgel Glyco HSi. La separación se logra utilizando las diferencias en las interacciones iónicas entre el grupo de intercambio catiónico en la superficie de resina de la columna y los componentes de hemoglobina en una elución de gradiente escalonado. Las fracciones de hemoglobina (designadas como A1a, A1b, F, LA1c, SA1c, A0 y H-V0, H-V1, H-V2) se eliminan posteriormente del material de la columna mediante una elución por pasos utilizando tampones de elución HSi variantes 1, 2 y 3 que tienen concentraciones específicas de sal y pH. Los componentes de hemoglobina separados pasan a través de la celda de flujo del fotómetro LED donde se miden los cambios en la absorbancia a 415 nm. El software G8 integra y reduce los datos sin procesar y luego calcula los porcentajes relativos de cada fracción de hemoglobina. La impresión consta de los resultados numéricos y el cromatograma. Esto representa los cambios en la absorbancia frente al tiempo de retención para cada fracción de pico. Un análisis requiere solo 1,6 minutos. El estudio se realizó en 150 pacientes, de los cuales el 80% eran diabéticos tipo ll, edad de 40-65 años, con HbA1c entre 6.9-11%, HbA de 6-8, HbF de más de 1%-8% (en el 48% de los casos fue HbF positiva), el grupo control fueron no diabéticos, sospechosos, dislipidémicos, pacientes sin signos de diabetes tipo II, el motivo de la prueba era porque tenían resistencia a la insulina alta, o moderada, algunas de estas pacientes estaban con síndrome de ovario poliquístico. Además de la absoluta precisión del método HPLC en la prueba de HbA1c, en este estudio encontramos HbF positiva en pacientes con diabetes tipo II, lo que nos lleva a la anemia, y se cree que la causa de esta anemia es un deterioro de la función renal, como la nefropatía diabética, complicación de la diabetes tipo II, pero un mecanismo aún no claro entre la HbF congénita anormal y la diabetes tipo II permanecerá sin involucrar ya que no pudimos analizar a todos los pacientes con electroforesis de Hb. A partir de estos hallazgos de laboratorio, la HbF da como resultado un aumento de la patología: además de ser una forma congénita innata, su nivel elevado también se encontró en casos de anemia perniciosa, anemia hemolítica, talasemia, tirotoxicosis, trombosis venosa profunda, etc. LA1c como forma lábil de la Hb glucosilada, podría aumentar en caso de presencia de Hb carbamilada (urea, pacientes con enfermedades renales) y Hb acetilada (abuso de alcohol, enfermedades hepáticas, etc.), por supuesto aumento de la glucosa en sangre.

 Cuando el nivel de glucosa en sangre es alto, las moléculas de glucosa se adhieren a los glóbulos rojos, cuanto más prolongada es la hiperglucemia, más se une la glucosa a la Hb y mayor es la Hb glucosilada. Por lo tanto, en este estudio encontramos aproximadamente un 35% de casos con LA1c positivo, donde la nefropatía diabética ya había comenzado, lo que se confirmó mediante microalbuminuria positiva y con el informe del médico nefrólogo. Formas anormales de los valores de HbF en nuestro país, y en estos 150 casos no hubo otras formas anormales de Hb, por otro lado encontramos una correlación entre la HbF positiva que tenía homocisteína sérica aumentada fácilmente o moderadamente o hiperhomocisteinemia y el 10% de ellos eran con mutante MTHFR positivo (alrededor del 15% de estos pacientes que tuvieron la oportunidad de hacerse la prueba, sus hallazgos de laboratorio fueron valores séricos de homocisteína de 15-17, rango de referencia para adultos 5-15 μmol/L, método de inmunoensayo-Imulite-2000 analizadores para la determinación cuantitativa de L-homocisteína en suero humano (Siemens), y otros datos anamnésicos de estos casos fueron en parte con signos clínicos como edema de piernas y dolor de piernas, por lo que como sabemos, la hiperhomocisteína es un indicador de enfermedad cardiovascular, enfermedad coronaria, enfermedad arteriosclerótica temprana, tromboembolismo arterial, y este riesgo está presente por hipercolesterolemia, también por Homocistinuria como defectos genéticos.

Resultados:

La homocisteína total (tHcy) ha surgido como un factor de riesgo importante en la evaluación de la enfermedad cardiovascular. La tHcy, un aminoácido que contiene tiol, se produce por la desmetilación intracelular de la metionina. La Hcy sirve así como un depósito que puede recuperarse más tarde para su uso en la remanufactura de metionina a través de la acción de la enzima metionina sintasa dependiente de folato o cisteína utilizando la vía de transulfuración dependiente de B6. La dependencia del folato y la B6 es otra razón para la conexión de la anemia con la diabetes tipo II, porque está presente una forma HBF positiva que nos indicó que debíamos realizar más y más pruebas, por lo que esto nos llevó a realizar una consulta de seguimiento con el cirujano vascular, que requiere MTHFR con 2 mutaciones y otras pruebas de hemostasia. Los resultados de las mutaciones de MTHFR fueron del laboratorio Synlab en Alemania. La mutación MTHFR c677T en el 11% de estos casos fue mutante positiva.

Conclusión:

Concluimos con los hechos que la HPLC puede ser considerada libremente el método de diagnóstico de referencia, ya que ha demostrado ser el mejor método. El riesgo de prediabetes fue del 20% de nuestros pacientes, con valores de HbA1c entre 6-6,4%, aproximadamente el 10% de nuestros pacientes tenían valores de HbA1c superiores al: 6,5%, examinados por primera vez, que se consideran diabéticos, aproximadamente el 25% tenían un control adecuado: con valores de 6,6-7%, y un control inadecuado según la ADA (criterios de la Asociación Americana de Diabéticos) con valores de HbA1c del 7-8%, aproximadamente el 45% de ellos. En el mecanismo de los hallazgos de HBF y de HbA1c, con HPLC el mismo paciente diabético puede recibir un diagnóstico temprano de: complicaciones de la diabetes como daño renal, daño hepático, anemia, arteriosclerosis temprana, tromboembolia, riesgo de ICV, etc.