Ji-Yeon Kim, Sung-Il Kang, Jin Ju Lee, Kichan Lee, So-Ra Sung, Suk Chan Jung, Yong Ho Park, Han-Sang Yoo y Moon Her
Para diagnosticar eficazmente la brucelosis, se han desarrollado muchos métodos de detección específicos de género y especie basados en PCR. Junto con los ensayos de PCR convencionales, se han desarrollado técnicas de PCR en tiempo real como herramientas de diagnóstico rápido. Entre ellas, se ha recomendado la PCR en tiempo real utilizando una sonda de hibridación (hybprobe) para bacterias con alta homología de ADN entre especies, con la que es posible hacer un diagnóstico preciso mediante una curva de amplificación y análisis de picos de fusión. Se diseñó una hybprobe para B. abortus a partir de un polimorfismo de un solo nucleótido (SNP) específico en el gen fbaA. Esta sonda solo mostró amplificación específica de B. abortus a partir de aproximadamente el ciclo 14, dado un pico de fusión a 69 °C. La sensibilidad de la PCR en tiempo real resultó ser de 20 fg/μl por dilución de ADN de 10 veces, y el límite de detección fue de 4 UFC en muestras clínicas. Esta PCR en tiempo real mostró una mayor sensibilidad que la de la PCR convencional y la PCR en tiempo real previa basada en sonda Taqman. Por lo tanto, este nuevo ensayo de PCR en tiempo real podría ser útil para diferenciar la infección por B. abortus con rapidez y precisión.