Revista de Bacteriología y Parasitología

Abstracto

Dinámica y costo de aptitud de Entrobacter cloacae genéticamente modificado que expresa defensina para paratransgénesis en Phlebotomus papatasi

Rangin Abassi, Maryam Akhlaghi, Mohammad Ali Oshaghi, Amir Ahmad Akhavan, Mohammad Reza Yaghoobi-Ershadi, Rounak Bakhtiary y Fatemeh Mohtarami

Antecedentes: La bacteria Enterobacter cloacae subsp. disuelvens es un comensal conocido de la microflora intestinal de Phlebotomus papatasi , el principal vector de la leishmaniasis cutánea zoonótica, y nominada para la paratransgénesis en flebótomos. En este estudio, evaluamos la dinámica y los costos de adaptación de E. cloacae modificada genéticamente para determinar su potencial para servir como un "caballo de Troya" en P. papatasi .

Métodos: La cepa modificada de E. cloacae se transformó con un plásmido de proteína fluorescente roja más defensina (EC-DR) expresado constantemente activo y se administró a colonias de flebótomos a través del alimento para larvas. Se utilizaron como controles una bacteria de tipo salvaje (EC-WT) y alimento intacto. Se probaron los caracteres de aptitud física, así como la dinámica de la EC-DR en varias etapas de desarrollo de larvas de flebótomos colocando muestras homogeneizadas en placas y contando las colonias que expresaban fluorescencia en el medio de agar Tet-BHI.

Resultados: La proteína fluorescente roja productora de DR de Enterobacter cloacae se pudo aislar del intestino de las larvas después de 36 días cuando las bacterias se agregaron una vez en las macetas de larvas. El EC-DR con múltiples aplicaciones no tuvo efecto negativo en el tiempo de emergencia de larvas de estadio II, pupas y adultos, pero aumentó ligeramente la tasa de mortalidad de larvas de P. papatasi . El experimento también confirmó la falta o la transmisión transestadial débil de DR de E. cloacae en P. papatasi . Tiene un costo de adaptación mínimo en el comportamiento alimentario y la supervivencia de P. papatasi .

Conclusión: Los resultados de este estudio mostraron que E. cloacae DR es adecuado para la paratransgénesis de P. papatasi solo en la etapa adulta porque no se transmitió transestadialmente.