Genética hereditaria: investigación actual

Abstracto

Pruebas ELISA para la determinación de ocratoxina A mediante anticuerpo monoclonal anti-ocratoxina A o fragmento F(ab')2

Yavor Ivanov

Resumen
Lasocratoxinas A son posibles carcinógenos humanos y el desarrollo de inmunoensayos sensibles para su determinación en alimentos es una tarea muy importante. El objetivo de este estudio fue desarrollar ELISA sensibles sobre la base de anticuerpos monoclonales de ratones (mAb) contra la ocratoxina A (OTA) o su fragmento F(ab')2. El mAb de ratones se produjo in vitro utilizando técnicas de cultivo de tejidos. Se midió la actividad del mAb anti-OTA obtenido. El fragmento F(abʹ)2 del mAb anti-OTA se obtuvo por hidrólisis de pepsina del mAb producido. Se realizó un ELISA indirecto utilizando el fragmento F(ab')2 obtenido y el mAb anti-OTA. Se utilizó un anticuerpo secundario marcado con peroxidasa. Las características analíticas del ELISA indirecto con el fragmento F(abʹ)2 se compararon con las del mAb. El rango lineal de OTA en tampón de fosfato en el inmunoensayo con el fragmento F(ab')2 fue de 0,1 a 100 ng/mL. El rango lineal del inmunoensayo con el mAb anti-OTA completo fue de 0,1 a 10 ng/mL. Los resultados obtenidos se compararon con mAb de ratones certificados frente a ocratoxina A. El rango lineal con el mAb certificado fue de 1 a 500 ng/mL. Los ELISA desarrollados con el fragmento F(abʹ)2 obtenido o el mAb anti-OTA producido tienen la posibilidad de medir concentraciones bajas de OTA.