Michelle D de Oliveira, André S de Oliveira, Nina R Dutra, Rafael FO França, Eduardo R Honda, Fernando B Zanchi, Clovis A Neves, Cynthia C da Silva, Benedito AL da Fonseca y Sérgio O De Paula
Varios intentos de desarrollar vacunas recombinantes de subunidades contra el dengue han fracasado debido a niveles insuficientes de expresión y plegamiento incorrecto de la proteína E. Para verificar la importancia de la proteína de membrana precursora en el nivel de expresión de la proteína E, construimos dos plásmidos recombinantes clonando la secuencia completa del gen prM de las cepas del virus del dengue-2 y del dengue-3 en un plásmido que expresa una versión truncada de la proteína E del virus del dengue-2. A continuación, evaluamos estos dos constructos para determinar su efecto en los niveles de expresión de la proteína E in vitro. Nuestros resultados mostraron que ambos plásmidos proporcionaron una expresión correcta de la proteína E, ya que se detectó la expresión de la proteína E en células Vero transfectadas, como se demostró mediante inmunofluorescencia indirecta e inmunotransferencia. El análisis densitométrico de los Western blots de los extractos celulares mostró una expresión 67,02% mayor de la proteína E en las células transfectadas con pCID2EtD3prM, lo que indica que la secuencia prM del virus del dengue-3 puede ser más eficaz para ayudar al procesamiento correcto de la proteína E. Los resultados de este estudio pueden utilizarse para aumentar la producción in vitro del antígeno de la proteína E para su uso en vacunas y con fines diagnósticos.