Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Establecimiento y caracterización de nuevas células madre pluripotentes inducidas porcinas que expresan hrGFP

Yu-Jing Liao, Chia-Hsin Liao, Jiunn-Wang Liao, Kuo Yuan, Yu-Zhan Liu, Yi-Shiou Chen, Lih-Ren Chen y Jenn-Rong Yang

Las células madre pluripotentes inducidas (iPS) se han establecido en varias especies animales desde 2006. El cerdo es un modelo potencialmente útil en la medicina regenerativa humana, y las características de las células madre embrionarias porcinas (pES) fueron muy similares a las células madre embrionarias humanas (hES). En el presente estudio, las células madre pluripotentes inducidas porcinas recombinantes humanizadas trazables que expresan la proteína fluorescente verde (piPS/hrGFP+) se generaron a partir de fibroblastos de oreja porcina (pEF) mediante la introducción de cuatro factores de transcripción humanos (Sox2, Oct4, Klf4 y c-Myc) construidos en vectores lentivirus. Las células piPS/hrGFP+ expresaron de forma continua y constante la señal de hrGFP durante más de 90 pases durante 20 meses a pesar de los subcultivos repetidos. También conservaron las características definidas típicas, incluida la proliferación continua con estado indiferenciado, la expresión de marcadores de pluripotencia pluripotentes ES (Oct4, AP, SSEA-3, SSEA-4, TRA-1-60 y TRA-1-81) y el mantenimiento de un cariotipo normal (36+XY). También se revelaron con éxito tres capas germinales embrionarias a partir de la diferenciación in vitro por formación de EB. Varios análisis histológicos y tinciones inmunohistoquímicas de los teratomas revelaron varios tejidos derivados de tres capas germinales embrionarias, incluidos tejidos neurales, tejidos epidérmicos que contienen queratina , músculo esquelético , músculo liso, cartílago, tejidos adiposos y estructuras glandulares. Estos resultados respaldan que las células piPS/hrGFP+ pueden generarse a partir de pEF mediante reprogramación directa, y estas células piPS/hrGFP+ rastreables serían beneficiosas para futuras aplicaciones en el trasplante de células y la regeneración de tejidos.