Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Expansión de células madre derivadas de tejido adiposo humano procesadas de forma semiautomática en un medio suplementado con suero autólogo y antioxidantes

Li-Yi Sun, Dian-Kun Li, Pao-Jen Chen, Yu-Yu Joyce Ho, Jon-Son Kuo, Ching-Feng Cheng, Kuei-Fang Lee, Yao-Jen Chang y Cheng-Yoong Pang

Objetivo: El tejido graso extirpado (EFT) es una fuente excelente de células madre derivadas de tejido adiposo (ADSC) para la terapia celular autóloga. Sin embargo, la técnica actual para extirpar tejidos grasos con tijeras quirúrgicas convencionales y utilizando un medio de cultivo que contenga suero bovino fetal (FBS) puede no cumplir con las pautas de Buenas Prácticas Tisulares (BPT). Por lo tanto, desarrollamos un proceso semiautomatizado que cumple con las pautas mencionadas anteriormente para fabricar ADSC de grado clínico a partir de pequeños volúmenes de EFT. Métodos: Se desarrolló un proceso semiautomatizado utilizando un tubo dispersor desechable operado en una estación de trabajo de dispersor de tubos para obtener fracción vascular estromal (SVF) a partir de EFT. Se formuló un medio de cultivo suplementado con suero autólogo humano (HAS) y adyuvante de cultivo de células madre mesenquimales (MCA) que consistía en factor de crecimiento de fibroblastos básico (bFGF/FGF-2) y antioxidantes, para expandir ADSC a partir de SVF in vitro. Resultados: El proceso semiautomatizado puede mejorar notablemente la producción de células y reducir el tiempo de operación para triturar los tejidos de una hora a unos pocos minutos. El crecimiento de las ADSC fue más lento en el medio HAS al 10 % que en el medio suplementado con FBS, pero su crecimiento en el medio HAS al 10 % que contenía MCA (HAS al 10 % + MCA) fue superior a ambos medios. El medio HAS al 10 % + MCA también promovió la adipogénesis, la osteogénesis, la condrogénesis y aumentó la expresión de CD44, CD73 y los genes de pluripotencia en las ADSC. Conclusión: Nuestro novedoso proceso semiautomatizado proporciona un aislamiento eficiente de SVF, y el medio HAS al 10 % + MCA acelera el crecimiento de las ADSC a partir de pequeñas cantidades de EFT sin perder su capacidad de diferenciación.