Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Expresión y producción de anticuerpos policlonales contra la proteína recombinante de la cubierta del virus de la necrosis del brote del maní

Sivaprasad Y, Bhaskara Reddy BV, Sujitha A y Sai Gopal DVR

Se utilizó una estrategia de expresión génica in vitro para la producción de antisuero policlonal contra la proteína de la cubierta (CP) del virus de la necrosis del brote del maní (PBNV). El gen CP del GBNV del aislado del maní se clonó en el vector de expresión pQE-30UA y se transformó en células de Escherichia coli (M15). La expresión del gen CP del GBNV se indujo in vitro y la proteína recombinante (~34 KDa) se purificó y se utilizó para la inmunización de conejos para producir el antisuero policlonal específico del GBNV. El antisuero tenía un título de 1:5000 en un ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) indirecto y reaccionó específicamente en Western blot. El antisuero resultante se utilizó para desarrollar un ensayo de reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa por inmunocaptura (IC-RT-PCR) y se compararon sus niveles de sensibilidad con ELISA para la detección de aislados del GBNV. El antisuero recombinante detectó con éxito la infección natural de GBNV en cultivos económicamente importantes y malezas hospedantes del sur de la India