Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Formulación de un nuevo método de esterilización de superficies y de un medio de cultivo para el aislamiento de actinomicetos endofíticos de plantas medicinales y su actividad antibacteriana

Waheeda K y Shyam KV

Los actinomicetos endofíticos de plantas medicinales rara vez se informaron en comparación con los de fuentes terrestres y marinas. Los resultados actuales correlacionan la presencia de actinomicetos endofíticos en plantas medicinales al aislarlos de tres plantas medicinales, es decir, Ocimum basillicum, Withania somnifera y Rauvolfia tetraphylla. En el presente trabajo, se estandarizó el método y el medio de esterilización de superficies y se aislaron 32 actinomicetos endofíticos de tres plantas medicinales. Evaluamos la eficiencia de cuatro métodos de esterilización de superficies diferentes y cuatro medios para el aislamiento de actinomicetos endofíticos. El método con hipoclorito de calcio, hidrogenocarbonato de sodio y azida de sodio (Nuevo método) utilizado fue más eficaz para eliminar microorganismos epífitos. Entre los cuatro medios probados, el agar almidón-caseína (SCA) resultó ser el mejor medio para el aislamiento de actinomicetos endofíticos. Hemos logrado obtener un crecimiento rápido y lujoso de un cultivo puro de actinomicetos endofíticos en ISP-4 (M) modificado (agar con solución de sal inorgánica) en comparación con el ISP-4(S) estándar. El ensayo antibacteriano preliminar de todos los aislados se probó mediante una prueba de confrontación. La selección secundaria de los aislados seleccionados se probó mediante una prueba de difusión en disco utilizando un extracto de acetato de etilo que mostró una actividad antibacteriana de amplio espectro contra los patógenos humanos de prueba. Con base en los caracteres morfológicos y fenotípicos, se identificaron 12 aislados como Streptomyces spp. Entre los 12 aislados, A3 como representante se caracterizó por SEM e identificó por análisis de 16SrRNA como Streptomyces flavoviridis A3WK, mostró una actividad antibacteriana significativa contra el patógeno humano de prueba. Este es el primer informe de aislamiento exitoso de actinomicetos endofíticos de dichas plantas medicinales, para utilizar el método de esterilización de superficie recientemente formulado y un nuevo estudio comparativo en el medio ISP-4.