Revista de Patología Vegetal y Microbiología

Abstracto

Transformación genética de plantas de alfalfa ( Medicago varia L.) Cultivar doméstico 'Burgaltai' para aumentar el tamaño de las hojas

Uuganzaya Myagmarjav*, Enkhchimeg Vanjildorj, Altantsetseg Khajidsuren

La variedad de alfalfa 'Burgaltai' es el forraje más importante en Mongolia y su rendimiento ha disminuido en las últimas décadas debido a la polinización cruzada. Este estudio se realizó para aumentar el tamaño de las hojas de la variedad 'Burgaltai' a través de la transformación genética mediada por Agrobacterium, transfiriendo el gen del factor regulador del crecimiento AtGRF2 de Arabidopsis thaliana. La regeneración in vitro se derivó de explantos de hipocótilo y cotiledón de siete días de edad para la inducción de callos. Los callos inducidos se utilizaron para la inducción y proliferación de brotes. Los brotes proliferados se llevaron a un medio de inducción de raíces. El mejor medio de inducción de callos fue el medio MSB5 (medio de Murashige Skoog con vitamina de Gamborg) suplementado con 2 mg/L de 2,4-D, 0,2 mg/L de BAP y 1 mg/L de NAA, el medio de inducción y proliferación de brotes a partir de callos fue el medio MSB5 suplementado con 1 mg/L de BAP, 0,1 mg/L de NAA, los brotes proliferados se enraizaron en medio MSB5 a la mitad de su concentración suplementado con 0,5 mg/L de NAA. Para la transformación genética, se utilizaron explantos de hipocótilo como fuente inicial. En total, se probaron 235 explantos para la transformación y 30 explantos (12,7%) fueron resistentes a los antibióticos de higromicina y regeneraron plántulas. Las plántulas se transfirieron al suelo y se utilizaron hojas jóvenes frescas para el ensayo histoquímico de GUS y RT-PCR para confirmación. Entre ellas, se confirmaron siete plántulas transgénicas independientes completamente regeneradas (T6, 8, 11, 12, 13, 15, 22). El tamaño de las hojas de alfalfa del cv. transgénico 'Burgaltai' aumentó en 0,7 cm ² en comparación con el tipo silvestre. Las líneas T6 y 11 mostraron una relación de segregación de 3:1 en las progenies T1 (X2=0,04-0,42, p ≤ 0,52-0,84).