Revista de investigación y terapia con células madre

Abstracto

Pautas para optimizar la supervivencia y la capacidad de migración de las células madre mesenquimales equinas

Sarah Broeckx, Cynthia de Vries, Marc Suls, Deborah J Guest y Jan H Spaas

Antecedentes: Aunque la terapia con células madre mesenquimales (MSC) se utiliza comúnmente en medicina veterinaria , no se describen pautas específicas para garantizar una supervivencia y migración celular óptimas. Sin embargo, esto es indispensable para asegurar un uso clínico óptimo. Métodos: En el presente estudio, se aislaron y caracterizaron MSC derivadas de sangre periférica (SP) equina. Con el fin de determinar los parámetros óptimos para la criopreservación a largo plazo , se evaluaron los efectos de diferentes concentraciones de dimetilsulfóxido (DMSO) (5-20%) y métodos de descongelación (temperatura controlada o descongelación manual) en la viabilidad de MSC mediante tinción con azul tripán. Posteriormente, se evaluó el almacenamiento de MSC durante 12 meses utilizando solo 10% de DMSO como crioprotector sin congelación de velocidad controlada. Luego, se evaluó la influencia de anestésicos y geles inyectables de uso frecuente en la viabilidad de MSC. Finalmente, se evaluó la capacidad de migración de MSC a través de ácido hialurónico a diferentes concentraciones. Resultados: En primer lugar, demostramos que la concentración de DMSO y el método de descongelación no tuvieron una influencia considerable en la viabilidad de las MSC dentro de la evaluación de 4 horas después de la descongelación. En segundo lugar, los anestésicos fueron altamente citotóxicos y solo el 10% de las MSC sobrevivieron 3 horas de su presencia. Los geles basados ​​en ácido hialurónico y glicosaminoglicano fueron compatibles con las MSC y permitieron una alta supervivencia celular (más del 90%) dentro de las 48 horas de seguimiento. Sin embargo, en un gel de poliacrilamida, aproximadamente el 80% de las MSC murieron dentro de las 48 horas. Finalmente, la concentración del gel influyó en la capacidad de migración de las MSC. De hecho, solo el 60% de las MSC en 20 mg/ml de ácido hialurónico se adhirieron a la superficie subyacente dentro de las 48 horas, mientras que casi el 100% de las MSC en 10 mg/ml de la misma sustancia pudieron migrar a través del gel. Conclusión: El presente estudio informa pautas prácticas para la aplicación clínica de MSC derivadas de PB equino.