Revista de farmacogenómica y farmacoproteómica

Abstracto

Escalera de ADN casera de 100 pares de bases basada en el plásmido bacteriano pMAL-C2X

Firuzeh Badreh1, Khodakaram Jahanbin2, Ali Khodadadi2, Ali Khorasani Zadeh2, Moosa Sharifat2, Milad Khayati2, Mohammad Rashno2,3

Antecedentes: La mayoría de los hallazgos de investigación en biología molecular requieren marcadores como escaleras de ADN para detectar y cuantificar la longitud de los fragmentos de ácido nucleico mediante electroforesis en tareas de rutina.

Métodos: En este estudio, informamos sobre un método para preparar una escalera de ADN de 100 pares de bases basado en la técnica de PCR. El plásmido bacteriano pMAL-C2X se utilizó como ADN molde en la PCR. Los productos de PCR se extrajeron con fenol/cloroformo, se precipitaron con etanol y se mezclaron proporcionalmente.

Resultados: Finalmente, se diseñó con éxito un conjunto de 7 primers (5 revers y 2 forward). Los fragmentos de PCR amplificados se cuantificaron mediante nanodrop y el tamaño de las bandas se estimó mediante electroforesis en gel junto con una escala comercial de 100 pb co-migratoria en gel de agarosa al 1,5%. Los resultados indicaron que las bandas claras y nítidas de 100 pb a 1000 pb se generaron con éxito mediante una reacción en PCR.

Conclusión: Nuestro producto casero es un producto competitivo con mercado comercial y puede ser preparado con un método sencillo, económico y con baja probabilidad de banda no específica.