Abstracto

Identificación y caracterización de los orígenes de replicación de múltiples cromosomas en Rhodobacter sphaeroides.

Berra Koskulu, Abha Choudhary, Hannah Johnson, Hyuk Cho y Madhusudan Choudhary

La replicación del ADN se ha estudiado ampliamente en varias especies bacterianas, que poseen un genoma unipartito que consiste en un solo cromosoma circular. Aproximadamente el 10% de las especies bacterianas secuenciadas tienen una estructura genómica multipartita, que se compone de múltiples cromosomas. Sin embargo, la coordinación y regulación de la replicación multicromosómica en bacterias sigue siendo poco conocida. Rhodobacter sphaeroides posee un genoma multipartito que consta de dos cromosomas, el cromosoma primario (CI) de aproximadamente 3 Mb y el cromosoma secundario (CII) de 0,9 Mb. Los análisis de la curva Z y de la desviación estándar de GC revelaron que CI y CII de R. sphaeroides presentan tres y cinco regiones de origen cromosómico putativas, respectivamente. Luego, las regiones flanqueantes de estas regiones putativas se analizaron más a fondo en términos de conservación génica, densidad génica y proporciones génicas entre las cadenas directas y complementarias correspondientes, identificadas previamente cerca de los orígenes replicativos biológicamente confirmados de especies bacterianas que estaban estrechamente relacionadas con R. sphaeroides. Posteriormente, todas las regiones replicadoras putativas se clonaron en un plásmido pLO1, un vector suicida en R. sphaeroides. La replicación autónoma de estos plásmidos recombinantes en R. sphaeroides se examina más a fondo utilizando métodos de conjugación y moleculares. Los resultados demostraron que CI y CII de R. sphaeroides tienen un único origen de replicación en sus cromosomas, respectivamente, y esto proporcionará la base para futuros trabajos sobre la coordinación y el control de la replicación y la segregación de Múltiples cromosomas en bacterias.

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